الفرق الرئيسي - HPLC مقابل HPTLC
الفرق الرئيسي بين HPLC و HPTLC هو أن HPLC يسمح بالفصل الكمي للمكونات في عينة بينما لا يسمح HPTLC بالفصل الكمي للمكونات في العينة.
الكروماتوغرافيا هي طريقة فصل مادية تُستخدم لفصل وتحديد المكونات في الخليط. كل من HPLC و HPTLC هما تقنيات كروماتوغرافية. HPLC هو تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء. HPTLC هو كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة عالية الأداء.
ما هو HPLC؟
HPLC هو كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء. إنها تقنية تحليلية تستخدم لفصل وتحديد وقياس المكونات في الخليط.في هذه التقنية ، يتم إذابة العينة في مذيب مناسب. ثم يتم تمرير المذيب مع العينة عبر مضخة ذات ضغط معين. تمتلئ المضخة بمواد ماصة صلبة. ثم ترتبط بعض المكونات بقوة بالمادة الماصة بينما ترتبط المكونات الأخرى بشكل غير محكم. هذا يتسبب في أن يكون للمكونات معدلات تدفق مختلفة عبر المضخة. لذلك يمكن فصل المكونات بسهولة.
الشكل 01: نظام HPLC
تُعرف المادة الممتزة التي تملأ المضخة بالمرحلة الثابتة. يُعرف المذيب مع العينة المذابة بالطور المتحرك. المضخة المستخدمة في هذه التقنية تسمى العمود. يمتلئ العمود بمادة ماصة ، وهي جزيئات السيليكا الأكثر شيوعًا. قد يتراوح حجم هذه الجسيمات من 2-50 ميكرومتر. تتأثر عملية الفصل بتكوين الطور المتحرك ودرجة حرارة النظام.يمكن أن تكون التفاعلات بين المرحلة الثابتة والمكون في العينة تفاعلات كارهة للماء ، وتفاعلات ثنائية القطب ، وترابط أيوني ، وما إلى ذلك.
ضغط تشغيل جهاز HPLC أعلى بكثير من ضغط الكروماتوغرافيا السائلة التقليدية. تقع حول 50-350 بار. الفرق بين الكروماتوغرافيا السائلة و HPLC هو أنه في الكروماتوغرافيا السائلة ، تسقط العينة من خلال العمود تحت الجاذبية بينما ، في HPLC ، يتم ضغط العينة من خلال العمود. حجم العمود والجسيمات الماصة صغيرة جدًا أيضًا عند مقارنتها بالكروماتوغرافيا السائلة التقليدية. ومع ذلك ، فإن الدقة التي توفرها تقنية HPLC متفوقة.
ما هو HPTLC؟
HPTLC هو كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة عالية الأداء. إنه الشكل المتقدم والآلي لـ TLC التقليدي. توفر هذه التقنية دقة فعالة في فترة زمنية قصيرة. في طريقة التحليل هذه ، يمكن تحليل العينة والمرجع في نفس الوقت ، مما يسمح بمقارنة العينة بالمرجع.يعطي دقة تحليلية محسنة من التقنيات الكروماتوغرافية الأخرى. الوقت المستغرق في التحليل أقل. هذه التقنية هي تقنية منخفضة التكلفة.
الشكل 02: تحليل أصباغ الطعام باستخدام HPTLC
طريقة HPTLC هي عملية بسيطة ، كما تم إلغاء خطوة تحضير العينة (في TLC التقليدي ، يتم تضمين خطوة تحضير العينة قبل الفصل. تتضمن هذه الخطوة التنظيف والإثراء). يمكن استخدام المذيب مباشرة دون أي معالجة مسبقة على الرغم من أن تقنيات الكروماتوغرافيا الأخرى تتطلب معالجات مسبقة مثل التفريغ والترشيح وما إلى ذلك.
مادة الامتصاص المستخدمة في HPTLC هي السيليكا بأحجام جزيئات صغيرة جدًا. في TLC التقليدي ، يكون حجم جزيئات السيليكا 5-20 ميكرومتر بينما ، في HPTLC ، يكون 4-8 ميكرومتر. يتم تطبيق العينة على لوحة HPTLC باستخدام قضيب.يعطي تطبيق موحد وآمن. ثم توضع الألواح في غرفة ذات مرحلة متحركة. يجب أن تكون الغرفة مشبعة ببخار الطور المتحرك. بعد عملية HPTLC ، يمكن اكتشاف البقع التي انتقلت. عند الكشف عن البقع على اللوحة ، تستخدم تقنية HPTLC منطقة مناسبة للأشعة فوق البنفسجية أو غرفة اليود.
ما هو الفرق بين HPLC و HPTLC؟
HPLC مقابل HPTLC |
|
| HPLC كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء. | HPTLC هو كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة عالية الأداء. |
| تقنية | |
| في HPLC ، يتم تمرير الطور المتحرك مع المذيب عبر عمود مملوء بالطور الثابت. | في HPTLC ، يتم رصد العينة على لوحة TLC ويتم وضعها داخل غرفة تحتوي على الطور المتحرك ؛ ثم يُسمح للعينة بالانتقال إلى أعلى اللوحة جنبًا إلى جنب مع الطور المتحرك. |
| القياس | |
| في HPLC ، يتم استخدام الاختلافات بين معدلات تدفق المكونات عبر العمود لفصل المكونات في العينة. | في HPTLC ، يتم استخدام الاختلافات بين المسافات التي يقطعها كل مكون في العينة لفصل المكونات في العينة. |
| الفصل الكمي | |
| يسمح HPLC بالفصل الكمي للمكونات في العينة. | لا يسمح HPTLC بالفصل الكمي للمكونات في العينة. |
ملخص - HPLC مقابل HPTLC
HPLC و HPTLC هما تقنيتان كروماتوجرافيان. يتمثل الاختلاف الرئيسي بين HPLC و HPTLC في أن HPLC يسمح بالفصل الكمي للمكونات في العينة بينما لا يسمح HPTLC بالفصل الكمي للمكونات في العينة.
