الاختلاف الرئيسي بين RP HPLC و HIC هو أن RP HPLC يستخدم طورًا متحركًا أكثر قطبية وطورًا ثابتًا أقل قطبية. حيث يستخدم HIC مرحلة ثابتة كارهة للماء تسمح للجزيئات الكارهة للماء بالارتباط بها.
الكروماتوغرافيا هي تقنية تحليلية تساعد على فصل الخليط إلى مكوناته. أولاً ، علينا حل العينة لفصلها إلى محلول. يُطلق على خليط المحلول-المادة هذا الطور المتحرك. ثم يتم تمرير الطور المتحرك من خلال مادة أخرى تسمى المرحلة الثابتة. تحدد المرحلة الثابتة فصل المكونات. يحدث الفصل بسبب تقسيم المادة بين الطور المتحرك والمرحلة الثابتة.
ما هو RP HPLC؟
يشير المصطلح RP HPLC إلى كروماتوغرافيا سائلة عكسية عالية الأداء. إنه ينطوي على فصل المكونات في خليط ، وفقًا للكارهة للماء. ترتبط المكونات الكارهة للماء في الطور المتحرك بالروابط الكارهة للماء في المرحلة الثابتة ، بينما يتم فصل المكونات المحبة للماء خلال المرحلة الثابتة دون الالتصاق بسطح المرحلة الثابتة.
الشكل 01: جهاز HPLC
علاوة على ذلك ، تتمتع هذه الطريقة بإمكانية استنساخ أكبر مقارنة بتقنيات كروماتوغرافيا أخرى ، كما أنها تُظهر قابلية تطبيق واسعة. لذلك ، نستخدم هذه الطريقة في المختبرات لأكثر من 75٪ من جميع طرق HPLC. في معظم الأحيان ، نستخدم مزيجًا مائيًا من الماء مع مذيب عضوي قطبي قابل للامتزاج كمرحلة متحركة.وبالتالي ، سيضمن ربط المكونات الكارهة للماء في المحلول بسطح المرحلة الثابتة.
ما هو HIC؟
يشير المصطلح HIC إلى كروماتوغرافيا التفاعل الكارهة للماء. إنه نوع من الطور العكسي HPLC ، وتستخدم هذه الطريقة بشكل أساسي لفصل الجزيئات الحيوية الكبيرة مثل البروتينات. في هذه الطريقة ، نحتاج إلى استخدام وسط مائي لعمل عينة من الجزيء الحيوي. ذلك لأن المذيبات العضوية يمكن أن تتسبب في تغيير طبيعة البروتينات. علاوة على ذلك ، تستخدم هذه التقنية التفاعل بين الجزيئات الكبيرة مع سطح كاره للماء قليلاً للمرحلة الثابتة. علاوة على ذلك ، يتعين علينا استخدام تركيز عالٍ من الملح في العينة لأنه يشجع على الاحتفاظ بالبروتين في العبوة ؛ هذه العملية تسمى التمليح. من خلال تقليل تركيز الملح تدريجيًا ، يمكننا جعل الجزيئات الحيوية تتم إزالتها بشكل منفصل وفقًا لكونها كارهة للماء.
عادة ، تستخدم هذه الطريقة الشروط المعاكسة لظروف كروماتوغرافيا التبادل الأيوني.في هذه التقنية ، نحتاج أولاً إلى تمرير محلول منظم عبر العمود لتقليل إذابة المذاب في العينة. يجعل المناطق الكارهة للماء من البروتين لفضح. ومع ذلك ، عندما يكون الجزيء أكثر كارهًا للماء ، يلزم تقليل الملح لتعزيز الارتباط. هنا ، يتم التخلص من المواد المذابة الأقل كارهة للماء أولاً ، ووفقًا للتغير في تركيز الملح ، يتم التخلص من المزيد من المواد المذابة الكارهة للماء أخيرًا.
ما هو الفرق بين RP HPLC و HIC؟
اللوني هي تقنية تحليلية لفصل المكونات في خليط. RP HPLC و HIC هما تقنيتان كروماتوجرافيان متخصصان. يتمثل الاختلاف الرئيسي بين RP HPLC و HIC في أن RP HPLC يستخدم طورًا متحركًا أكثر قطبية وأقل طورًا ثابتًا قطبيًا ، بينما يستخدم HIC طورًا ثابتًا كارهًا للماء ، مما يسمح للجزيئات الكارهة للماء بالارتباط بها.
الرسم البياني أدناه يلخص الفرق بين RP HPLC و HIC.
ملخص - RP HPLC مقابل HIC
اللوني هي تقنية تحليلية لفصل المكونات في خليط. RP HPLC و HIC هما تقنيتان كروماتوجرافيان متخصصان. يتمثل الاختلاف الرئيسي بين RP HPLC و HIC في أن RP HPLC يستخدم طورًا متحركًا أكثر قطبية وطورًا ثابتًا أقل قطبية ، بينما يستخدم HIC مرحلة ثابتة كارهة للماء ، مما يسمح للجزيئات الكارهة للماء بالارتباط بها.
