الفرق الرئيسي بين DNA الجينومي وعزل DNA البلازميد هو أن عزل الحمض النووي الجينومي يستهدف استخراج الحمض النووي الجيني بينما يستهدف عزل DNA البلازميد استخراج DNA البلازميد للبكتيريا.
عزل الحمض النووي هو عملية كيميائية تستخدم لعزل الحمض النووي من أنواع مختلفة أو من عينات مختلفة. يعد عزل الحمض النووي مهمًا في تقنيات البيولوجيا الجزيئية اللاحقة ، مثل الرحلان الكهربائي للهلام ، وتفاعل البوليميراز المتسلسل ، وتقنيات تسلسل الحمض النووي. لذلك ، فإن عزل الحمض النووي هو عملية كيميائية أساسية في الدراسات البيولوجية الجزيئية. بناءً على الغرض من البحث ، يكون من الضروري أحيانًا عزل الحمض النووي الجيني.بالإضافة إلى ذلك ، تركز بعض الدراسات على عزل DNA البلازميد من البكتيريا. عزل الحمض النووي الجينومي هو عملية عزل الحمض النووي الجيني من عينة بدائية النواة أو عينة حقيقية النواة. تختلف خطوات العزل حسب نوع الخلية التي يعزل فيها الحمض النووي. عزل DNA البلازميد هو عملية عزل DNA البلازميد من خلية بكتيرية. بالمقارنة مع عزل الحمض النووي الجيني ، فإن العملية الكلية معقدة في عزل DNA البلازميد.
ما هو عزل الحمض النووي الجيني؟
عزل الحمض النووي الجينومي هو عملية استخراج الحمض النووي الجيني الكامل للكائن الحي. تتضمن هذه العملية الخاصة ثلاثة أحداث رئيسية. هم ، تحلل الخلايا أو التحلل النووي ، تدهور البروتين أو تحلل البروتينات وترسيب الحمض النووي الجيني. قد تختلف خطوة التحلل وفقًا لنوع الخلية. في بدائيات النوى ، نظرًا لوجود جدار خلية ببتيدوغليكان ، يجب أن تكون الخطوة الأولى هي انهيار جدار الخلية. من ناحية أخرى ، في حقيقيات النوى ، تتضمن خطوة التحلل انهيار غشاء البلازما والغشاء النووي لإخراج الحمض النووي إلى الخارج.في المقابل ، الخطوات الخاصة ضرورية لتذليل جدران الخلايا النباتية والفطرية.
الشكل 01: عزل الحمض النووي الجيني
نتيجة لذلك ، بمجرد اكتمال خطوة التحلل ، سيصل الحمض النووي في النهاية إلى المادة الطافية. في الوقت نفسه ، يحدث تدهور البروتين أيضًا في المحلول بسبب إضافة بروتيناز ك. الخطوة التالية هي فصل الحمض النووي الجيني والبروتينات المتدهورة عن بعضها البعض. وبالتالي ، تنفصل البروتينات المتدهورة عن طريق الترسيب مما يسمح للحمض النووي الجيني بالبقاء في المادة الطافية. بعد ترسيب البروتينات ، يمكن ترسيب الحمض النووي الجيني وإعادة تعليقه في مخزن مؤقت مناسب حتى يتطلب التجربة.
DNA الجينومي ، وهو DNA خطي يحتوي على جميع المعلومات الجينية للكائن الحي.بمعنى آخر ، الجينوم هو مادة وراثية لكائن حي مسؤول عن جميع الأنشطة الهيكلية والوظيفية للخلية. وهو يتألف من كل من تسلسل الحمض النووي المشفر وغير المشفر. عند عزل الحمض النووي الجينومي ، فإنه يشمل الجينوم الكامل للكائن الحي.
ما هو عزل DNA البلازميد؟
عزل DNA البلازميد هو عملية خاصة وأكثر تعقيدًا لعزل الحمض النووي. البلازميدات عبارة عن دنا خارج الصبغيات موجود في معظم الخلايا البكتيرية. وهي عبارة عن دنا دائري نائم يدعم البكتيريا للبقاء على قيد الحياة في ظروف بيئية قاسية. يتكون DNA البلازميد من جينات مقاومة خاصة توفر مزايا إضافية للبكتيريا مثل مقاومة المضادات الحيوية وخصائص الفوعة والخصائص السامة.
الشكل 02: عزل DNA البلازميد
يتضمن عزل DNA البلازميد أيضًا ثلاث عمليات رئيسية ؛ تحلل الخلايا وتحلل البروتين وترسيب الحمض النووي. على الرغم من أن آلية العزل البيوكيميائية مشابهة لآلية عزل الحمض النووي الجيني ، إلا أن العملية أكثر تعقيدًا منها. تعتبر عملية تحلل الخلايا أهم عملية في هذا الإجراء. الأهم من ذلك ، لا ينبغي خلط الحمض النووي الجيني والحمض النووي البلازميدي مع بعضهما البعض. لذلك ، يتم دمج عملية تحلل أكثر اعتدالًا في إجراء عزل DNA البلازميد. ومن ثم ، في معظم إجراءات عزل DNA البلازميد ، يتم استخدام المنظفات ؛ كبريتات دوديسيل الصوديوم لتحلل الخلية.
ما هي أوجه التشابه بين الحمض النووي الجينومي وعزل DNA البلازميد؟
- تركيز الحمض النووي الجيني وعزل DNA البلازميد على استخراج الحمض النووي للكائن الحي.
- أيضًا ، كلاهما يتبع نفس العملية الشاملة التي تشمل تحلل الخلايا وتدهور البروتين وترسيب الحمض النووي.
- علاوة على ذلك ، فإن الحمض النووي الناتج لكلتا العمليتين مهم للعمليات النهائية.
- علاوة على ذلك ، تشتمل كلتا عمليتي العزل على خطوات لتنقية وتخزين الحمض النووي في ظل ظروف تخزين محددة.
- إلى جانب ذلك ، يتم استخدام بروتيناز K في كلتا الطريقتين لتحطيم البروتينات.
ما هو الفرق بين الحمض النووي الجيني وعزل الحمض النووي البلازميد؟
يركز عزل الحمض النووي الجينومي على استخراج الحمض النووي الجينومي الكامل للكائن المستهدف بينما يركز عزل DNA البلازميد على عزل DNA البلازميد فقط من الأنواع البكتيرية المعينة. لذلك ، هذا هو الفرق الرئيسي بين الحمض النووي الجيني وعزل DNA البلازميد. علاوة على ذلك ، هناك فرق آخر بين عزل DNA الجينومي وعزل DNA البلازميد في الإجراء. يعتبر عزل الحمض النووي الجيني إجراءً أقل تعقيدًا مقارنة بعزل DNA البلازميد. ومن ثم ، عند عزل DNA البلازميد ، من الضروري اتخاذ الاحتياطات اللازمة لمنع اختلاط الحمض النووي الجينومي والبلازميد مع بعضهما البعض.
يوفر infograohic أدناه مزيدًا من التفاصيل حول الفرق بين DNA الجينومي وعزل DNA البلازميد.
ملخص - DNA الجينومي مقابل عزل DNA البلازميد
عزل الحمض النووي عملية مهمة في تقنيات البيولوجيا الجزيئية. هناك نوعان من الحمض النووي هما DNA الجينومي و DNA البلازميد (DNA خارج الكروموسومات). بناءً على المتطلبات ، تم تنفيذ بعض الإجراءات لعزل الحمض النووي الجيني بينما تركز بعض الإجراءات على عزل DNA البلازميد فقط من البكتيريا. ومن ثم ، فإن الخطوات المتضمنة في كلتا العمليتين تختلف قليلاً عن بعضها البعض. ومع ذلك ، فإن العملية الكلية هي نفسها في كلا العزلة. الحمض النووي المعزول لكلتا العمليتين له استخدام هائل في عمليات المصب مثل الاستنساخ ، والرحلان الكهربائي للهلام ، وتفاعلات البلمرة المتسلسلة.في نهاية بروتوكول عزل الحمض النووي الجيني ، يمكن عزل الحمض النووي الجيني بأكمله للكائن الحي كمنتج نهائي بينما في نهاية بروتوكول عزل DNA البلازميد ، يمكن عزل DNA البلازميد للبكتيريا المعنية كمنتج نهائي. لذلك ، هذا هو الفرق بين الحمض النووي الجيني وعزل DNA البلازميد.
