الاختلاف الرئيسي بين التركيز اللوني والتركيز الكهربي هو أن التركيز اللوني هو نوع من طريقة كروماتوغرافيا العمود التي تستخدم راتنجات التبادل الأيوني بينما التركيز الكهربي هو نوع من تقنية الرحلان الكهربائي التي تستخدم مواد هلامية متدرجة الأس الهيدروجيني ثابتة.
التركيز اللوني والتركيز الكهروضوئي هما طريقتان تفصلان البروتينات وفقًا لنقاطها الكهربية. يتمتع كل من التركيز اللوني والتركيز الكهروضوئي بقدرة حل كبيرة. التركيز اللوني هو طريقة كروماتوغرافيا العمود عالية الدقة بينما التركيز الكهربي هو طريقة فصل كهربي.علاوة على ذلك ، لا يستخدم التركيز اللوني مجالًا كهربائيًا بينما يحتاج التركيز المتساوي الكهربي إلى مجال كهربائي.
ما هو التركيز اللوني؟
التركيز اللوني هو نوع من اللوني عالي الشطف الذي يفصل البروتينات وفقًا للاختلافات في نقطتها الكهروضوئية. يستخدم عمود راتنج التبادل الأيوني وتدرج الأس الهيدروجيني المطور داخليًا. على عكس التركيز الكهروضوئي ، لا يتضمن التركيز اللوني مجالًا كهربائيًا. يعد التركيز اللوني تقنية تنقية قوية يمكنها حل الجزيئات المتشابهة للغاية حتى التي تختلف فقط بمقدار 0.02 وحدة من الأس الهيدروجيني. لذلك ، فإن التركيز اللوني هو الأنسب كخطوة تلميع نهائية عندما تكون الدقة العالية مطلوبة لفصل المكونات المتشابهة جدًا.
في التركيز اللوني ، يتم تطبيق العينة على العمود عن طريق مزجها مع المخزن المؤقت للبدء. البروتينات التي تكون عند درجة حموضة أعلى من نقطة تساويها الكهربية مشحونة سلبًا وتبقى بالقرب من أعلى العمود بينما تهاجر البروتينات الأخرى التي تكون عند درجة الحموضة أقل من نقطة تساوي الكهرباء إلى أسفل العمود.يُستخلص البروتين الذي يحتوي على أعلى نقطة تساوي كهربيًا أولاً ، بينما تتم إزالة البروتين الذي يحتوي على أقل نقطة تساوي كهربية أخيرًا من العمود. تتأثر هذه التقنية بعدة عوامل مثل ترسيب البروتين والخطية لتدرج الأس الهيدروجيني.
ما هو التركيز الكهروضوئي؟
التركيز الكهروضوئي هو تقنية تفصل الجزيئات المختلفة بناءً على نقطة تساوي الكهرباء. ومن المعروف أيضا باسم التركيز الكهربائي. غالبًا ما تستخدم هذه التقنية لفصل البروتين في مادة هلامية. في التركيز المتساوي الكهربي ، تُضاف العينة إلى مواد هلامية متدرجة الأس الهيدروجيني (IPG) ثابتة. IPG gel عبارة عن مصفوفة هلامية من مادة الأكريلاميد تمت بلمرة مشتركة مع تدرج درجة الحموضة. تهاجر البروتينات نحو القطب السالب حتى تجد منطقة الأس الهيدروجيني لنقاطها الكهربية. عندما يصل البروتين إلى الرقم الهيدروجيني الذي لا يحتوي على شحنة صافية ، تتوقف الهجرة وتعطي نطاقًا ثابتًا. وبالمثل ، يعطي كل بروتين نطاقًا عند نقطة في تدرج الأس الهيدروجيني المقابل لنقطة تساوي الكهرباء.
الشكل 01: التركيز الكهروضوئي
التركيز الكهروضوئي هو الخطوة الأولى في الرحلان الكهربائي للهلام ثنائي الأبعاد. في هذه التقنية ، يتم فصل البروتينات أولاً وفقًا لنقاطها الكهربية بالتركيز الكهربي المتساوي ثم يتم فصلها بوزنها الجزيئي من خلال SDS-PAGE.
ما هي أوجه التشابه بين التركيز اللوني والتركيز الكهروضوئي؟
- التركيز اللوني والتركيز الكهروضوئي هما طريقتان عاليتا الدقة.
- كلاهما يعتمد على النقطة الكهربية للبروتينات.
- تستخدم هذه التقنيات تدرج الأس الهيدروجيني.
- كلا الإجراءين مفيدان لتوصيف متغيرات الهيموجلوبين البشري.
- يمكنهم حل الجزيئات حيث تختلف قيم pI بأقل من 0.02 وحدة pH.
ما هو الفرق بين التركيز اللوني والتركيز الكهروضوئي؟
تركيز كروماتوجرافي هو تقنية كروماتوغرافيا العمود عالية الدقة التي تفصل البروتينات وفقًا لنقطة متساوية الكهرباء. على النقيض من ذلك ، فإن التركيز الكهربي المتساوي هو تقنية كهربية تفصل البروتينات وفقًا لنقطة تساوي الكهرباء عن طريق تطبيق مجال كهربائي على طول تدرج الأس الهيدروجيني المتكون في الشعيرات الدموية. إذن ، هذا هو الفرق الرئيسي بين التركيز اللوني والتركيز الكهروضوئي.
هناك اختلاف آخر بين التركيز اللوني والتركيز الكهربي وهو أن التركيز اللوني لا يتضمن مجالًا كهربائيًا بينما يحتاج التركيز الكهروضوئي إلى مجال كهربائي.
ملخص - التركيز اللوني مقابل التركيز الكهروضوئي
التركيز اللوني والتركيز الكهروضوئي هما طريقتان متشابهتان تتمتعان بقدرة عالية على حل الجزيئات ، وخاصة الجزيئات المتشابهة جدًا. التركيز اللوني هو تقنية كروماتوغرافيا العمود عالية الدقة في حين أن التركيز متساوي الكهربي هو طريقة الفصل الكهربائي. لا يتضمن التركيز اللوني مجالًا كهربائيًا ، على عكس التركيز الكهروضوئي. وبالتالي ، هذا يلخص الفرق بين التركيز اللوني والتركيز الكهربي.
