الفرق الرئيسي بين جزء Klenow و DNA polymerase 1 هو أن جزء Klenow هو جزء كبير من DNA polymerase 1 الذي يفتقر إلى نشاط 5 ′ إلى 3 exonuclease بينما DNA polymerase هو إنزيم من E. coli الذي يحتوي على الثلاثة المجالات بما في ذلك 5 ′ إلى 3 نشاط نوكلياز خارجي.
إن بوليميراز الحمض النووي هو أحد الإنزيمات الرئيسية المشاركة في تكرار الحمض النووي في الكائنات الحية. توجد أشكال مختلفة من إنزيم بوليميريز الحمض النووي الموجود في حقيقيات النوى وبدائيات النوى بناءً على الحجم والشكل. تم العثور على بوليميريز الحمض النووي 1 و 2 و 3 فقط في الكائنات بدائية النواة ، وهي تلعب أدوارًا مختلفة في تكرار الحمض النووي.يحتوي DNA polymerase 1 على ثلاثة مجالات مع 5 إلى 3 polymerase و 3 إلى 5 نشاط نوكلياز خارجي و 5 إلى 3 نشاط نوكلياز خارجي. جزء Klenow هو منتج بروتيني لبوليميراز DNA 1. يمتلك 5 إلى 3 بوليميراز و 3 إلى 5 أنشطة نوكلياز خارجية لبوليميراز DNA السليم 1 ، لكنه يفتقر إلى نشاط 5 إلى 3 نوكلياز خارجي.
ما هو جزء Klenow؟
جزء Klenow هو جزء كبير من بوليميريز الحمض النووي 1. على عكس بوليميريز الحمض النووي 1 ، 5 إلى 3 نشاط نوكلياز خارجي لا يُرى في جزء Klenow لأنه يفتقر إلى مجال نوكلياز خارجي للأمام 5 إلى 3. يتم إنتاج شظايا Klenow عن طريق هضم DNA polymerase 1 مع بروتياز يسمى subtilisin ، وهو إنزيم هضم البروتين. في بعض التطبيقات ، يصبح نشاط 3 إلى 5 نوكلياز خارجي لجزء Klenow غير مرغوب فيه. يمكن إزالته عن طريق إدخال طفرة في الجين الذي يشفر جزء Klenow. يُعرف الإنزيم الناتج الذي يحتوي على نشاط 5 إلى 3 بوليميراز فقط باسم جزء exo-Klenow.من الناحية الشكلية ، يشبه جزء Klenow اليد اليمنى للإنسان. يحتوي على N-terminal 3′-5 مجال نوكلياز خارجي ومجال C-terminal polymerase مفصول بحوالي 30 A.
الشكل 01: جزء Klenow و DNA Polymerase 1
جزء Klenow هو أداة مهمة في التقنيات البيولوجية الجزيئية. شظايا Klenow لها استخدامات متعددة. إنها مهمة للغاية في الاستنساخ غير الحاد من أجل إنتاج شظايا غير حادة. يمكن لشظايا Klenow إزالة 3 المتدلية أو ملء 5 المتدلية لتشكيل نهايات حادة. علاوة على ذلك ، تُستخدم شظايا Klenow لتجميع الحمض النووي مزدوج الشريطة من خيوط مفردة. علاوة على ذلك ، يتم استخدامها لإعداد المجسات ذات العلامات الإشعاعية باستخدام نشاط بوليميريز الحمض النووي المعتمد على الحمض النووي 5'إلى 3.
ما هو DNA Polymerase 1؟
إنزيم DNA polymerase 1 (Pol 1) هو إنزيم موجود في بدائيات النوى وهو ضروري لتكرار الحمض النووي البكتيري. وهو النوع الأول من بوليميراز الحمض النووي الذي اكتشفه آرثر كورنبرج في عام 1956. يعتبر بول 1 أكثر بوليميراز وفرة في الإشريكية القولونية. يتم ترميزه بواسطة الجين polA ويتكون من 928 من الأحماض الأمينية. يتكون من ثلاثة مجالات. جميع المجالات الثلاثة تفي بوظائف متميزة. يقوم مجالان بتنفيذ نشاط نوكلياز خارجي من 5 إلى 3 درجات ونشاط نوكلياز خارجي من 3 إلى 5 درجات. بسبب هذا النشاط الذي يمتلكه Pol 1 ، فهو شائع باعتباره إنزيمًا لإصلاح الحمض النووي بدلاً من إنزيم تكرار الحمض النووي. المجال الثالث لديه القدرة على تحفيز البلمرة المتعددة (5 ′ إلى 3 ′) قبل إطلاق قالب DNA وربط شظايا Okazaki معًا عن طريق ملء DNA جديد وإزالة اشعال RNA.
الشكل 02: بوليميريز الحمض النووي
تم استخدام Pol 1 المعزول من E Coli على نطاق واسع في التطبيقات الجزيئية. ومع ذلك ، بمجرد اكتشاف Taq Polymerase ، حل محل E Coli Pol 1 في تقنية PCR. إن بوليميراز Taq هو نوع من بوليميريز DNA القابل للحرارة والذي ينتمي إلى Polem 1.
ما هي أوجه التشابه بين جزء Klenow و DNA Polymerase 1؟
- جزء Klenow هو جزء كبير من بوليميريز الحمض النووي 1.
- لديهم نشاط بوليميريز الحمض النووي المعتمد على الحمض النووي من 5 إلى 3 و 3 إلى 5 نشاط نوكلياز خارجي يتوسط في التدقيق اللغوي.
- يتم استخدامها لأغراض متعددة.
ما هو الفرق بين جزء Klenow و DNA Polymerase 1؟
الفرق الرئيسي بين جزء Klenow و DNA polymerase 1 هو أن جزء Klenow يفتقر إلى 5 إلى 3 نشاط نوكلياز خارجي بينما يحتوي DNA polymerase 1 على 5 إلى 3 نشاط نوكلياز خارجي. لذلك ، يحتوي جزء Klenow على مجالين ، بينما يحتوي DNA polymerase 1 على المجالات الثلاثة.
يظهر الرسم البياني أدناه مزيدًا من التفاصيل حول الفرق بين جزء Klenow و DNA polymerase 1.
ملخص - جزء Klenow مقابل DNA Polymerase 1
DNA polymerase 1 هو إنزيم من E.coli الذي يحتوي على ثلاثة مجالات مثل مجال البلمرة 5 إلى 3 ومجال نوكلياز خارجي 3 إلى 5 ومجال نوكلياز خارجي من 5 إلى 3. جزء Klenow هو جزء كبير من بوليميريز الحمض النووي. يفتقر إلى مجال واحد من بوليميريز الحمض النووي 1 ، وهو مجال نوكلياز خارجي 5 إلى 3. الفرق الرئيسي بين جزء Klenow و DNA polymerase 1 هو أن شظايا Klenow لا تحتوي على مجال نوكلياز خارجي 5 إلى 3 بينما يحتوي DNA polymerase 1 على 5 إلى 3 مجال نوكلياز خارجي.
