الفرق الرئيسي بين ELISA التنافسي وغير التنافسي هو أن ELISA التنافسي يستخدم مستضد تثبيط بينما ELISA غير التنافسي لا يستخدم مستضد تثبيط للمقايسة.
مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) هي مقايسة مناعية تكتشف أهدافًا مختلفة مثل الأجسام المضادة ، والمستضدات ، والبروتينات ، والبروتينات السكرية. إنها طريقة سريعة وبسيطة في الأداء. وبالتالي ، يتم استخدامه في كثير من الأحيان لأغراض البحث والتشخيص. يتضمن ELISA استخدام الإنزيمات والربط المحدد للأجسام المضادة والمستضد. بناءً على كيفية حدوث التفاعلات ، هناك أربعة أنواع من ELISA: ELISA المباشر ، و ELISA غير المباشر ، و sandwich ELISA ، و ELISA المثبط. ELISA المباشر وغير المباشر والساندويتش هي أنواع من ELISA غير التنافسية بينما تثبيط ELISA هو نوع من ELISA التكميلي. الهدف الرئيسي من هذه المقالة هو مناقشة الفرق بين ELISA التنافسية وغير التنافسية.
ما هي الاليزا التنافسية؟
تقيس ELISA التنافسي تركيز المستضد في عينة من خلال الكشف عن تداخل الإشارة. هنا ، يستخدم الفحص مثبط مستضد. ومن ثم ، فهو نوع من ELISA تثبيط. خلال هذا الإجراء ، تتنافس المستضدات الموجودة في العينة مع مولد الضد المرجعي المحدد للارتباط بكمية محددة من الجسم المضاد المسمى. علاوة على ذلك ، يبدأ هذا الإجراء مع احتضان العينة ، مع وجود كمية زائدة من الجسم المضاد المسمى. أيضًا ، يجب أن يكون المستضد المرجعي مطليًا مسبقًا على لوحة فحص بئر متعددة. ثم يجب إضافة خليط العينة إلى لوحة الفحص التي تحتوي على المستضد المرجعي. سوف ترتبط الأجسام المضادة الحرة بالمستضد المرجعي اعتمادًا على كمية المستضد في العينة.وبالتالي ، في حالة وجود المزيد من عينة المستضد ، سيتم اكتشاف مستضد مرجعي أقل. وبالتالي ، فإنه يخلق إشارة أضعف.
الشكل 01: إليسا
في المقابل ، عندما تحتوي العينة على كمية أقل من المستضد ، فإن المزيد والمزيد من المستضد المرجعي سيشغل الأجسام المضادة ويعطي إشارة قوية. نظرًا لأن ELISA التنافسي يعطي إشارة أقوى عندما تحتوي العينة على كمية منخفضة من المستضدات ، فإن ELISA التنافسي هو اختبار حساس للغاية ، حتى بالنسبة للعينات التي تحتوي على عدد صغير من المستضدات.
في بعض مجموعات ELISA التنافسية ، يتم استخدام مستضد موسوم بدلاً من الجسم المضاد المسمى. هنا ، سيتنافس المستضد المسمى وعينة المستضد للارتباط بالجسم المضاد الأولي. وبالمثل ، عندما تكون كمية المستضد في العينة منخفضة ، فإن كمية المستضد المسمى الذي يرتبط بالأجسام المضادة سيكون أعلى ويخلق إشارة أقوى.
ما هي ELISA غير التنافسية؟
من بين الأنواع الأربعة لـ ELISA ، هناك ثلاثة أنواع غير تنافسية ELISA. هم ELISA المباشر ، ELISA غير المباشر ، وشطيرة ELISA. تعمل التنسيقات الثلاثة وفقًا للمبدأ المشترك لـ ELISA مع اختلافات طفيفة في منهجياتها.
يستخدم Direct ELISA جسمًا مضادًا أوليًا يسمى إنزيمًا. وبالتالي ، فإنه لا يتطلب جسمًا مضادًا ثانويًا. لذلك ، فإن ELISA المباشر أسرع من الأنواع الأخرى من ELISA. سوف يرتبط الجسم المضاد الأولي مباشرة بالمستضد المستهدف الثابت الموجود في اللوحة. وبالتالي ، سيحدث تفاعل الركيزة الإنزيمية ، مما ينتج عنه إشارة مرئية.
الشكل 02: ساندويتش إليسا
على عكس ELISA المباشر ، تستخدم ELISA غير المباشر جسمًا مضادًا أوليًا غير مسمى وجسم مضاد ثانوي مرتبط بالإنزيم.بمجرد أن يرتبط الجسم المضاد الأولي بالمولد المضاد الثابت ، فإن الجسم المضاد الثانوي يرتبط بالجسم المضاد الأولي. سيتفاعل الإنزيم الموجود في الجسم المضاد الثانوي مع المستضد وينتج إشارة مرئية. ساندويتش إليسا يختلف عن أليسا المباشر وغير المباشر. هنا ، يتم تثبيت الجسم المضاد على جدار لوحة الفحص.
ما هي أوجه التشابه بين ELISA التنافسية وغير التنافسية؟
- الاليزا التنافسية وغير التنافسية نوعان من تقنيات مقايسة الممتز المناعي.
- إنها تقنيات مرنة وحساسة للغاية.
- علاوة على ذلك ، كل من ELISA التنافسي وغير التنافسي عبارة عن مقايسات مناعية مرتبطة بالإنزيم.
- أيضًا ، تولد كلتا الطريقتين إشارة بسبب تفاعل الركيزة الإنزيمية.
ما هو الفرق بين ELISA التنافسية وغير التنافسية؟
التنافسي ELISA هو نوع من ELISA يعتمد على الإكمال بين مستضد التحليل والمستضد المسمى لكمية محدودة من الجسم المضاد المحدد.من ناحية أخرى ، لا توجد مثل هذه المنافسة بين مولد الضد ذي الأهمية والمستضد المرجعي في ELISA غير التنافسي. وبالتالي ، هذا هو الفرق الرئيسي بين ELISA التنافسية وغير التنافسية. وبالمثل ، فإن ELISA التنافسي هو تثبيط ELISA بينما ELISA غير التنافسي ليس مثبطًا لـ ELISA. لذلك ، هذا أيضًا فرق بين ELISA التنافسية وغير التنافسية.
علاوة على ذلك ، تعد ELISA التنافسية أكثر ملاءمة لقياس كمية منخفضة من المستضد محل الاهتمام. إنها طريقة حساسة. من ناحية أخرى ، لا تعتمد ELISA غير التنافسية على عدد المستضدات الموجودة في العينة. لذلك ، هذا أيضًا فرق بين ELISA التنافسية وغير التنافسية.
يوضح الرسم البياني أدناه الفرق بين ELISA التنافسي وغير التنافسي نسبيًا.
ملخص - تنافسية مقابل غير تنافسية ELISA
ELISA التنافسية وغير التنافسية هما النوعان الرئيسيان من ELISA أو مقايسات الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم. في تلخيص الاختلاف بين ELISA التنافسي وغير التنافسي ، تعتمد ELISA التنافسي على المنافسة بين مولد الضد ذي الأهمية والمستضد المرجعي تجاه الكمية المحدودة من الأجسام المضادة. لذلك ، تسمى ELISA التنافسية أيضًا باسم تثبيط ELISA. من ناحية أخرى ، لا تعتمد ELISA غير التنافسية على المنافسة بين المستضدات المستهدفة والمستضدات المرجعية. يستخدم فائضًا من الجسم المضاد المحدد المسمى تجاه المادة التحليلية ذات الأهمية. وبالتالي ، هذا هو الفرق الرئيسي بين ELISA التنافسية وغير التنافسية. ELISA المباشر ، ELISA غير المباشر ، وشطيرة ELISA هي الأنواع الثلاثة الرئيسية لـ ELISA غير التنافسية.
