الاختلاف الرئيسي بين ترشيح الهلام وكروماتوغرافيا التقارب هو أن كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي تعتمد على الاختلافات في الوزن الجزيئي أو حجم العينة التحليلية ، في حين أن كروماتوغرافيا التقارب تعتمد على تقارب التحليلة مع رابط ثابت.
يشير المصطلح اللوني في الكيمياء التحليلية إلى عملية فصل المكونات في خليط باستخدام تقنيات مختلفة. اللوني هو اسم جماعي يمثل عددًا مختلفًا من الطرق المختلفة للفصل.
ما هو كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي؟
كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي هي تقنية تحليلية يعتمد فيها فصل المكونات على الاختلاف في الوزن الجزيئي أو الحجم. تُعرف هذه التقنية أيضًا باسم كروماتوغرافيا استبعاد الحجم أو كروماتوغرافيا المنخل الجزيئي. تعتمد تقنية الفصل في هذه العملية على اختلاف قدرة الجزيئات في العينة على الدخول في مسام وسط الترشيح الهلامي.
في تقنية الترشيح الهلامي ، تحتوي المرحلة الثابتة على حبيبات من مادة رطبة تشبه الإسفنج لها مسام ذات أبعاد جزيئية تحتوي على نطاق ضيق من الأحجام. إذا مررنا محلولًا مائيًا يتكون من جزيئات ذات أحجام مختلفة من خلال عمود يحتوي على هذه "المناخل الجزيئية" ، فإن الجزيئات الأكبر من مسام وسط الترشيح تتحرك بسرعة عبر العمود. في المقابل ، تدخل الجزيئات الأصغر مسام الهلام وتميل إلى التحرك ببطء عبر العمود. تُزال الجزيئات من العمود بترتيب تناقص الحجم الجزيئي.هنا ، حد الاستبعاد للهلام هو الكتلة الجزيئية لأصغر الجزيئات غير القادرة على اختراق مسام هلام معين.
هناك أنواع مختلفة من تقنيات الفلترة الهلامية ، مثل طريقة الترشيح الهلامي غير المباشرة ، وترشيح الهلام في الحالة المستقرة ، وغسيل الكلى بخرز الهلام ، وما إلى ذلك. يعتبر اللوني بالترشيح الهلامي غير المباشر مفيدًا في تحديد هرمونات الغدة الدرقية الحرة. كروماتوغرافيا الترشيح الهلامية الثابتة هي تقنية غير مباشرة مفيدة في الغالب لقياس المنشطات الحرة مثل الكورتيزول والتستوستيرون وما إلى ذلك ، من ناحية أخرى ، يعد غسيل الكلى بالخرز الهلامي تعديلًا لترشيح الهلام المستقر وهو أبسط نسبيًا.
ما هو اللوني التقارب؟
كروماتوغرافيا التقارب هي تقنية تحليلية وطريقة فصل تعتمد على تفاعل ارتباط محدد بين يجند ثابت وشريكه الملزم.تتضمن بعض الأمثلة ارتباط الجسم المضاد بمولد الضد ، وربط الركيزة بالإنزيم ، وربط مثبط الإنزيم. لذلك فهذه التقنية لها العديد من التطبيقات الهامة في تنقية الحمض النووي وتنقية البروتين من مستخلصات الخلايا وتنقية الدم.
في هذه التقنية ، فإن الخاصية الأكثر أهمية هي تجميد الترابط. يمكننا استخدام مواد مختلفة مثل الأكريلات وهلام السيليكا لهذا الغرض. من المهم منع التداخل الفراغي للجزيء المستهدف في الترابط. علاوة على ذلك ، يتم توصيل المثبط بالمرحلة الصلبة. نسمي هذا المانع الفاصل. تقليديًا ، يتكون الفاصل من سلسلة هيدروكربونية.
تحتوي المرحلة الثابتة من كروماتوغرافيا التقارب على اللب ، والفاصل ، والرابط.في بعض الأحيان ، يحتوي أيضًا على أيون معدني مقترن بالرابط. الطور الصلب الأكثر تفضيلاً للمرحلة الثابتة في هذه التقنية هو هلام الاغاروز لأنه يسهل الاستغناء عنه لملء وتعبئة العمود بأسِرَّة من الراتينج من أي حجم ، وهي كبيرة بما يكفي لتدفق الجزيئات الحيوية بحرية داخل الخرزات وعبرها. يمكن أن ترتبط الروابط تساهميًا ببوليمر الخرزة بطرق مختلفة. أكثر مركبات المباعد شيوعًا هي بروميد السيانوجين ، الإيبوكسيد ، الإيبوكسيد مع حمض C6 ، والديامين. من ناحية أخرى ، يختلف الترابط الذي يمكننا استخدامه وفقًا للهدف ، على سبيل المثال ، مستضد الجسم المضاد ، أو الحديد أو أيونات-فوسفوبروتينات أيونات الألومنيوم ، أفيدين-بيوتين ، الجلوتاثيون- GST ، بروتينات مخلبة-ذات علامات مميزة ، إلخ.
ما هو الفرق بين الترشيح الهلامي وكروماتوغرافيا التقارب؟
اللوني تقنية تحليلية مهمة. اللوني بالترشيح الهلامي والكروماتوغرافيا المتقاربة نوعان من الاختلافات المهمة في الفصل اللوني. يتمثل الاختلاف الرئيسي بين ترشيح الهلام وكروماتوغرافيا التقارب في أن كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي تعتمد على الاختلافات في الوزن الجزيئي أو حجم عينة التحليل ، في حين أن كروماتوغرافيا التقارب تعتمد على تقارب التحليلة مع ترابط ثابت.
ملخص - الترشيح الهلامي مقابل كروماتوغرافيا التقارب
هناك أنواع مختلفة من تقنيات الكروماتوغرافيا وفقًا لتطبيقها وطبيعة عينة التحليل. الترشيح الهلامي وكروماتوغرافيا التقارب نوعان من هذه التقنيات. يتمثل الاختلاف الرئيسي بين ترشيح الهلام وكروماتوغرافيا التقارب في أن كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي تعتمد على الاختلافات في الوزن الجزيئي أو حجم عينة التحليل ، في حين أن كروماتوغرافيا التقارب تعتمد على تقارب التحليلة مع ترابط ثابت.
