الاختلاف الرئيسي بين الاغاروز و polyacrylamide الكهربائي للهلام هو أن الاغاروز الكهربائي يستخدم هلام الاغاروز المصب افقيًا لفصل أجزاء أكبر نسبيًا من الحمض النووي ، بينما يستخدم البولي أكريلاميد الكهربائي جل البولي أكريلاميد المصبوبة رأسياً لفصل شظايا الحمض النووي الأقصر.
الكهربائي هو نوع من التقنيات التي تستخدم مجالًا كهربائيًا مطبقًا عبر مصفوفة هلامية لفصل الجزيئات الحيوية مثل DNA و RNA والبروتينات. هذا الفصل للجزيئات الحيوية مثل DNA و RNA والبروتينات من خلال الرحلان الكهربائي يعتمد على الشحنة والحجم.يتم تحميل العينات في آبار الجل. في وقت لاحق ، يتم تطبيق المجال الكهربائي عبر الهلام. يتسبب الحقل في تحرك الجزيئات سالبة الشحنة نحو القطب الموجب. تعمل مصفوفة الهلام كمنخل جزيئي تمر من خلاله الجزيئات الصغيرة أو تنتقل بسرعة بينما تتحرك الجزيئات الأكبر ببطء. يتيح ذلك فصل الجزيئات بناءً على الشحن والحجم. لذلك ، يعد الاغاروز والهلام الكهربي بولي أكريلاميد نوعين من تقنيات الرحلان الكهربائي للهلام والتي تساعد بشكل أساسي على فصل الجزيئات بناءً على حجمها وشحنها.
ما هو الاغاروز جل الكهربائي؟
الاغاروز الكهربائي للهلام هو تقنية تستخدم المواد الهلامية الاغاروز لفصل الجزيئات الحيوية مثل DNA و RNA. إنها تقنية تستخدم لفصل الأحماض النووية بشكل أساسي عن طريق الحجم. المركب الرئيسي المسمى agarose المستخدم في هذه التقنية هو عديد السكاريد. إنها تأتي من الأعشاب البحرية. يمكن إذابة Agarose في المخزن المؤقت للغليان ومن ثم يمكن سكبه في صينية يتم حفظها أفقيًا.في الدرج ، يصبح صلبًا عندما يبرد ليشكل لوحًا. يتم سكب المواد الهلامية Agarose بمشط في مكانها لعمل آبار يتم فيها تحميل الأحماض النووية مثل DNA أو RNA بمجرد أن يصلب الجل.
الشكل 01: الرحلان الكهربائي لجل الاغاروز
يتم غمر الجل لاحقًا في مخزن مؤقت مناسب ، ويتم تطبيق تيار عبر الجل. يحتوي الحمض النووي على شحنة سالبة منتظمة مستقلة عن تكوين تسلسل الجزيء. لذلك ، سوف تهاجر جزيئات الحمض النووي من الكاثود (-) نحو القطب الموجب (+). معدل الهجرة يعتمد بشكل مباشر على حجم الجزيء. تواجه الجزيئات الكبيرة أصعب وقت في التنقل عبر الهلام. من ناحية أخرى ، تنزلق الجزيئات الكبيرة عبر الهلام بسرعة وسهولة.
ما هو بولي أكريلاميد جل الكهربائي؟
بولي أكريلاميد الكهربائي للهلام (PAGE) هي تقنية تستخدم المواد الهلامية المتعددة الأكريلاميد لفصل الجزيئات الحيوية. إنها تقنية تُستخدم على نطاق واسع لفصل الجزيئات البيولوجية ، عادةً البروتينات والأحماض النووية ، وفقًا لقدرتها على الحركة الكهربية. ينتج عن ترطيب الأكريلونيتريل تكوين جزيئات الأكريلاميد بواسطة هيدراتاز النتريل. مادة الأكريلاميد قابلة للذوبان في الماء ، وعند إضافة محفزات الجذور الحرة ، تتبلمر مادة الأكريلاميد ، مما يؤدي إلى تكوين هلام بولي أكريلاميد. عادة ، تؤدي التركيزات المتزايدة من مادة الأكريلاميد إلى انخفاض حجم المسام في الهلام. يتم سكب المواد الهلامية بولي أكريلاميد عموديا ، على عكس المواد الهلامية الاغاروز.
الشكل 02: بولي أكريلاميد جل الكهربائي
في الرحلان الكهربائي للهلام متعدد الأكريلاميد ، قد تعمل الجزيئات في حالتها الأصلية ، مما يحافظ على بنية الجزيئات ذات الترتيب الأعلى. تسمى هذه الطريقة بالصفحة الأصلية. بدلاً من ذلك ، يمكن أيضًا إضافة مادة كيميائية مغيرة للتشكيل لإزالة البنية ذات الترتيب الأعلى وتحويل الجزيء إلى جزيء غير منظم تعتمد حركته على طوله فقط. هذا النوع يسمى SDS-PAGE.
ما هي أوجه التشابه بين Agarose و Polyacrylamide Gel Electrophoresis؟
- Agarose و polyacrylamide الكهربائي للهلام نوعان من تقنيات الرحلان الكهربائي للهلام.
- في الواقع ، إنها تقنيات بيولوجية جزيئية.
- يتم استخدام كلتا الطريقتين لاكتشاف الجزيئات البيولوجية الكبيرة مثل الحمض النووي والبروتينات.
- يتم تنفيذ هذه التقنيات من قبل فنيين أو باحثين مهرة.
- في كلا التقنيتين ، يعتمد فصل الجزيئات الكبيرة على الشحنة والحجم.
- كلا الطريقتين تسمحان بفصل الأحماض النووية مثل DNA و RNA.
ما هو الفرق بين Agarose و Polyacrylamide Gel Electrophoresis؟
Agarose الكهربائي للهلام هو تقنية تستخدم المواد الهلامية المصبوبة أفقياً لفصل الجزيئات الحيوية ، في حين أن التحليل الكهربائي للهلام متعدد الأكريلاميد هو تقنية تستخدم المواد الهلامية المصبوبة عموديًا من البولي أكريلاميد لفصل الجزيئات الحيوية. هذا هو الفرق الرئيسي بين الاغاروز والهلام الكهربي بولي أكريلاميد. علاوة على ذلك ، يستخدم الاغاروز الكهربائي للهلام لفصل الحمض النووي و RNA ، في حين يتم استخدام هلام البولي أكريلاميد الكهربائي لفصل الأحماض النووية مثل الحمض النووي ، أو الحمض النووي الريبي ، أو البروتينات.
الجدول التالي يلخص الفرق بين الاغاروز و البولي أكريلاميد الكهربائي للهلام.
ملخص - Agarose vs Polyacrylamide Gel Electrophoresis
Agarose و polyacrylamide الكهربائي للهلام نوعان من تقنيات الرحلان الكهربائي للهلام المستخدمة في مختبرات البيولوجيا الجزيئية.يستخدم الاغاروز الكهربائي للهلام هلام الاغاروز لفصل الجزيئات الحيوية. لا يعتبر Agarose بشكل عام سامًا للإنسان ، بينما يعتبر polyacrylamide سامًا للإنسان. علاوة على ذلك ، يُظهر الرحلان الكهربي لهلام الاغاروز دقة منخفضة بينما يُظهر الرحلان الكهربائي للهلام بولي أكريلاميد دقة أكبر. يستخدم الرحلان الكهربائي للهلام بولي أكريلاميد هلام بولي أكريلاميد لفصل الجزيئات الحيوية. هذا يلخص الفرق بين الاغاروز والهلام الكهربي بولي أكريلاميد
