الفرق الرئيسي - RPMI مقابل DMEM
تتضمن معظم الدراسات البحثية زراعة الخلايا الحيوانية ، وبالتالي ، تتطلب هذه الدراسات صيانة خطوط الخلايا الحيوانية في ظل ظروف نمو خاصة. يتم إجراء زراعة الخلايا الحيوانية على نطاق واسع في الدراسات الدوائية لتحديد التمثيل الغذائي للأدوية ، وتشخيص الأمراض وأبحاث السرطان. تعد وسائط زراعة الخلايا جانبًا مهمًا من ثقافة الخلايا الحيوانية. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) و Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) هما وسيلتان للثقافة تستخدمان في تربية الخلايا الحيوانية. RPMI هي وسيلة تستخدم على نطاق واسع لزراعة خلايا الثدييات في ثقافة التعليق. DMEM هو نوع معدل من الوسط القاعدي ، مع زيادة تركيز الأحماض الأمينية والفيتامينات حتى أربعة أضعاف.يستخدم DMEM في زراعة الخلايا في الثقافات الملتصقة. الفرق الرئيسي بين الوسيلتين هو نوع ثقافة وسائل الإعلام. يستخدم RPMI في مزارع التعليق ، بينما يستخدم DMEM لثقافة الخلايا الملتصقة.
ما هو RPMI؟
يُشار أيضًا إلىRPMI أو معهد Roswell Park Memorial Institute باسم RPMI 1640. تم اشتقاق اسم الوسائط من قبل المعهد الذي تم اكتشاف الوسائط فيه. تستخدم هذه الوسائط بشكل شائع في زراعة الخلايا الحيوانية ، خاصة لنمو خلايا الثدييات. تم تطويرها في الأصل لتنمية الخلايا الليمفاوية البشرية.
يتم تضمين المكونات التالية في RPMI.
- الجلوكوز
- مؤشر الأس الهيدروجيني (أحمر الفينول)
- أملاح (كلوريد الصوديوم ، بيكربونات الصوديوم ، فوسفات ثنائي الصوديوم ، كلوريد البوتاسيوم ، كبريتات المغنيسيوم ، ونترات الكالسيوم)
- الأحماض الأمينية
- فيتامينات (i-inositol ، كلوريد الكولين ، حمض بارا أمينوبنزويك ، حمض الفوليك ، نيكوتيناميد ، هيدروكلوريد البيريدوكسين ، هيدروكلوريد الثيامين ، بانتوثينات الكالسيوم ، البيوتين والريبوفلافين ، سيانوكوبالامين)
الميزة الخاصة لـ RPMI هي زيادة تركيز الفوسفات في الوسط. يستخدم RPMI في جو من ثاني أكسيد الكربون بنسبة 5٪. سيوفر هذا أقصى الظروف وأفضلها لنمو الخلايا. يتم الحفاظ على الرقم الهيدروجيني للوسائط عند 8.0 بواسطة نظام التخزين المؤقت للبيكربونات.
الشكل 01: ثقافة الخلية على طبق بتري
تطبيقات RPMI في زراعة الخلايا
- زراعة الخلايا الليمفاوية T و B البشرية وخلايا نخاع العظام والورم الهجين.
- يستخدم لدراسة الخلايا الورمية البشرية.
ما هو DMEM؟
Dulbecco's Modified Eagle’s Medium (DMEM) عبارة عن وسيط معدل تم إعداده تجاريًا. القوام الأصلي للمسحوق المتوسط أصفر. في DMEM ، يتم زيادة تركيز الفيتامينات حتى أربعة أضعاف وبالتالي زيادة محتوى العناصر الغذائية في الوسط.
يتم تعديل DMEM أيضًا بإضافة المزيد من الأملاح مثل نترات الحديديك وبيروفات الصوديوم وبعض الأحماض الأمينية غير الأساسية مثل السيرين والجليسين. يتم أيضًا تغيير تركيبة الجلوكوز في الوسائط. تتكون الصيغة الأصلية من 1000 مجم / لتر من الجلوكوز ، بينما في DMEM ، يتم زيادة التركيز حتى 4500 مجم / لتر. يتطلب DMEM أيضًا مكملات لوسط مصل لأنه ليس وسيطًا كاملاً. في أغلب الأحيان ، يُستكمل DMEM بمصل بقري الجنين (FBS). يوفر FBS البروتينات المطلوبة وعوامل النمو لعملية الاستزراع.
يختلف الأس الهيدروجيني للوسط عند إضافة بيكربونات الصوديوم. يكون الرقم الهيدروجيني للوسط قبل إضافة بيكربونات الصوديوم حوالي 6.80 - 7.40 ، في حين أن الرقم الهيدروجيني بعد إضافة بيكربونات الصوديوم يقع في نطاق 7.60 - 8.20. درجة حرارة تخزين الوسيط هي 2-80C.
الشكل 02: DMEM
تطبيقات DMEM
- لدراسة قدرة تشكيل البلاك للفيروس التورامي في الخلايا الجنينية للفأر.
- في دراسات منع الاتصال
- في البحث والتحليل مزارع خلايا الدجاج.
ما هي أوجه التشابه بين RPMI و DMEM؟
- يتم استخدام كل من RPMI و DMEM في زراعة الخلايا الحيوانية.
- كل من وسائط RPMI و DMEM عبارة عن تركيبات سائلة.
- تحتوي كل من وسائط RPMI و DMEM على الأحماض الأمينية الأساسية والفيتامينات والأملاح غير العضوية اللازمة للنمو.
- وسائط RPMI و DMEM غير مكتملة. لذلك يجب اضافة المصل.
- كل من وسائط RPMI و DMEM تستخدم الجلوكوز كمصدر للكربون.
- كل من وسائط RPMI و DMEM تحتوي على درجة حموضة أعلى.
ما هو الفرق بين RPMI و DMEM؟
RPMI مقابل DMEM |
|
| RPMI هي وسيلة تستخدم على نطاق واسع لزراعة خلايا الثدييات في ثقافة التعليق. | DMEM هو نوع معدل من الوسط القاعدي مع زيادة تركيز الأحماض الأمينية والفيتامينات. |
| وجود فوسفات إضافي | |
| موجود في RPMI. | غائب في DMEM. |
| استخدم | |
|
يستخدم لزراعة الخلايا في الثقافات الملتصقة. يستخدم ل
|
| أنواع الثقافة | |
| يستخدم RPMI للثقافات المعلقة. | DMEM يستخدم للثقافات ذات الخلايا الملتصقة. |
ملخص - RPMI مقابل DMEM
يستخدم كلا من RPMI و DMEM على نطاق واسع في زراعة الخلايا الحيوانية خاصة لزراعة خطوط الخلايا الحيوانية بما في ذلك الخلايا الليمفاوية في المختبر. DMEM هو وسيط قاعدي معدل حيث يوجد تركيز مغذي متزايد. تم تطوير RPMI بواسطة معهد Roswell Park Memorial ، وهو أيضًا وسيلة تستخدم في زراعة الخلايا الحيوانية خاصة للخلايا الليمفاوية في الثدييات.كلا الوسائط متوفرة تجاريًا. هذا هو الفرق بين RPMI و DMEM.
