الفرق الرئيسي بين التثقيب الكهربائي والحقن المجهري هو أن التثقيب الكهربائي هو تقنية تستخدم نبضًا كهربائيًا عالي الجهد لتوصيل الحمض النووي إلى الخلايا المضيفة بينما الحقن المجهري هو تقنية تستخدم إبرة زجاجية ذات رؤوس دقيقة أو الماصة الدقيقة لتوصيل الحمض النووي إلى الخلايا المضيفة. الخلايا المضيفة.
التحول هو العملية التي يتم من خلالها نقل الحمض النووي الغريب إلى الخلايا المضيفة. عن طريق التحول ، يمكن تغيير التركيب الجيني للكائن الحي. هناك طرق مختلفة للتحول الكيميائي والبيولوجي والفيزيائي. بعضها طرق مباشرة ، بينما البعض الآخر طرق غير مباشرة. التثقيب الكهربائي والحقن المجهري هما طريقتان فيزيائيتان هما طريقتان للتحول المباشر.يستخدم Electroporation مجالًا كهربائيًا للحث على المسام المجهرية في أغشية الخلايا البيولوجية من أجل دمج الحمض النووي في الخلايا المضيفة. من ناحية أخرى ، فإن الحقن المجهري يسلم الحمض النووي مباشرة باستخدام ماصة مجهرية أو إبرة زجاجية دقيقة.
ما هو التثقيب الكهربائي؟
Electroporation هي تقنية تحويل التي تنقل الحمض النووي إلى الخلايا النباتية والبروتوبلاست. تستخدم هذه التقنية نبضًا كهربائيًا عالي الجهد. يتم تحضين المواد النباتية في محلول عازل به DNA. ثم يخضع المحلول لنبض كهربائي عالي الجهد. يتم إنشاء مسام عالية الجهد في أغشية الخلايا النباتية ، ومن خلال هذه المسام ، ينتقل الحمض النووي داخل الخلايا ويتكامل مع الحمض النووي الجيني للنبات. كفاءة هذه الطريقة تعتمد على المواد النباتية وظروف المعالجة
الشكل 01: التثقيب الكهربائي
عندما يتم التحويل باستخدام electroporation ، فإن 40 إلى 50٪ فقط من الخلايا تتلقى الحمض النووي. علاوة على ذلك ، فإن 50٪ فقط من الخلايا المتحولة يمكنها البقاء على قيد الحياة في ظل هذه الطريقة. ومع ذلك ، فإن هذه الطريقة سهلة التنفيذ ولا تغير التركيب البيولوجي أو وظيفة الخلايا. علاوة على ذلك ، يمكن استخدامه لمجموعة واسعة من الخلايا.
ما هو الحقن المجهري؟
Microinjection تقنية تحويل مفيدة بشكل خاص عند إدخال الحمض النووي في الخلايا الكبيرة. تستخدم هذه الطريقة إبرة زجاجية رفيعة الأطراف أو ماصة صغيرة لتوصيل الحمض النووي إلى الخلايا الأولية النباتية أو الخلايا الحيوانية (البويضات والبيض والأجنة). في الواقع ، هذه الطريقة أكثر ملاءمة لصنع حيوانات معدلة وراثيًا مثل الفئران. في هذه الطريقة ، يتم دمج الحمض النووي مباشرة في النواة أو السيتوبلازم.
على غرار التثقيب الكهربائي ، الحقن المجهري هو أسلوب تحويل مباشر. يتم إجراء حقن مكروي تحت إعداد مجهر متخصص.أدى التحكم المحوسب في إمساك الماصة والإبرة والميكروسكوب وتكنولوجيا الفيديو إلى زيادة فعالية هذه التقنية. عند حقن الحمض النووي ، يمكن استخدام صبغة لتحديد الخلايا المحولة بسهولة. لذلك ، ليست هناك حاجة لاستخدام طريقة منفصلة لتحديد الخلايا المحولة. الأهم من ذلك ، أن إجراء الحقن المجهري لا يتطلب جين محدد.
الشكل 02: حقن مكروي
علاوة على ذلك ، هذه الطريقة فعالة للغاية وقابلة للتكرار. ومع ذلك ، فإن هذه الطريقة مكلفة وتستغرق وقتًا طويلاً وتتطلب مهارات شخصية. أيضًا ، يمكن معالجة عدد قليل فقط من الخلايا بهذه الطريقة.
ما هي أوجه التشابه بين Electroporation و Microinjection؟
- كلا من التثقيب الكهربائي والحقن المجهري نوعان من تقنيات التحول.
- هذه الطرق توصل الحمض النووي إلى الخلايا النباتية والبروتوبلاستس.
- هي طرق مباشرة.
- علاوة على ذلك ، فهي طرق فيزيائية أو ميكانيكية.
- كلا الطريقتين مفيدتان عند إنتاج النباتات والحيوانات المعدلة وراثيا.
ما هو الفرق بين التثقيب الكهربائي والحقن المجهري؟
تستخدم تقنية Electroporation مجالًا كهربائيًا لإدخال الحمض النووي بينما تقنية الحقن المجهري عبارة عن ماصة مجهرية أو إبرة زجاجية دقيقة لإدخال الحمض النووي. وبالتالي ، هذا هو الفرق الرئيسي بين التثقيب الكهربائي والحقن المجهري. علاوة على ذلك ، يستخدم التثقيب الكهربائي في الغالب للخلايا النباتية والبروتوبلاست بينما يستخدم الحقن المجهري في الغالب للخلايا الحيوانية. إلى جانب ذلك ، لا تستغرق عملية التثقيب الكهربائي وقتًا طويلاً مثل الحقن المجهري.
الرسم البياني أدناه يلخص الاختلافات بين electroporation و microinjection في شكل جدول.
ملخص - Electroporation مقابل Microinjection
Electroporation و microinjection طريقتان فيزيائية لنقل الجينات. يستخدم Electroporation مجالًا كهربائيًا عالي الجهد بينما يستخدم الحقن المجهري إبرة زجاجية أو ماصة مجهرية. وبالتالي ، هذا هو الفرق الرئيسي بين التثقيب الكهربائي والحقن المجهري. ومع ذلك ، فإن كلتا الطريقتين تدخل مباشرة الحمض النووي الخارجي في الخلايا المضيفة.
