الفرق الرئيسي بين Elisa و Elispot هو أن Elisa عبارة عن مقايسة ممتصة مناعية مرتبطة بالإنزيم تحدد التركيز الكلي لبروتينات الإشارة المفرزة ، في حين أن Elispot عبارة عن مقايسة ممتصة مناعية مرتبطة بالإنزيم والتي تكتشف الخلايا المفرزة للخلية.
إليسا وإليسبوت هما نوعان من مقايسات الممتز المناعي المرتبطين بالإنزيم تستخدمان على نطاق واسع في الطب وعلم أمراض النبات والتكنولوجيا الحيوية والصناعات الدوائية المختلفة. في هذه التقنيات ، يتم الكشف عن تحليل البروتين بواسطة جسم مضاد موجه ضده. إليسا هي أشهر مقايسة الممتز المناعي المرتبطة بالإنزيم المستخدمة في المختبرات. من ناحية أخرى ، فإن Elispot عبارة عن مقايسة ماصة مناعية مرتبطة بالإنزيم ولا تستخدم بدلاً من Elisa ولكنها تستخدم بدلاً من Elisa في المختبرات.
ما هو Elisa Assay؟
إليسا عبارة عن مقايسة ماصة مناعية مرتبطة بالإنزيم والتي تحدد التركيز الكلي لبروتينات الإشارات المفرزة. إنه اختبار كيمياء حيوية تحليلي واسع الاستخدام تم وصفه لأول مرة بواسطة Engvall و Perlmann في عام 1971. تستخدم هذه التقنية نوع المرحلة الصلبة من الإنزيم المناعي للكشف عن وجود بروتين معين في عينة سائلة باستخدام الأجسام المضادة الموجهة ضد هذا البروتين المحدد. هذا الاختبار هو أداة تشخيصية شائعة الاستخدام في الطب وأمراض النبات والتكنولوجيا الحيوية.
آلية اختبار ELISA
في معظم اختبارات ELISA ، يتم تثبيت كمية غير معروفة من المستضد على دعامة صلبة (لوحة ميكروليتر) في البداية. ثم يتم تطبيق الجسم المضاد الأساسي المطابق على سطح الدعم الصلب. يشكل هذا الجسم المضاد معقدًا مع المستضد (معقد الأجسام المضادة للمستضد). يمكن اكتشاف الجسم المضاد الأولي المرتبط بمولد الضد بواسطة جسم مضاد ثانوي مرتبط بإنزيم من خلال الاقتران الحيوي.في الخطوة الأخيرة من اختبار إليسا ، تتم إضافة مادة تحتوي على ركيزة الإنزيم. إذا كان هناك ارتباط مناسب لجسم مضاد أولي مع مولد الضد ، يتم إنتاج تغير لون يمكن اكتشافه بواسطة الركيزة. في النهاية ، هذا يحدد كمية المستضد في العينة.
الشكل 01: أنواع مختلفة من إليسا
علاوة على ذلك ، هناك طرق مختلفة لإليسا ، مثل إليسا المباشر وإليسا غير المباشر. حاليًا ، تُستخدم اختبارات إليسا المختلفة للكشف عن مسببات الأمراض البشرية مثل المتفطرة السلية ، والفيروس العجلي ، وفيروس التهاب الكبد B ، وفيروس التهاب الكبد C ، والسموم المعوية المنتجة للإشريكية القولونية ، وفيروس نقص المناعة البشرية ، و SARS-CoV-2.
ما هو Elispot Assay؟
Elispot هو مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم الذي يكتشف خلايا إفراز السيتوكين الفردية. وصف Cecil Czerkinsky لأول مرة ELISpot في عام 1983.إنه نوع من الفحص الذي يركز على القياس الكمي لتكرار إفراز السيتوكين لخلية واحدة. يتم تصنيفها أيضًا على أنها تقنية تستخدم الأجسام المضادة للكشف عن تحليل البروتين البيولوجي أو الكيميائي. مقايسة Fluorospot هو تباين في اختبار Elispot ، والذي يستخدم التألق لتحليل التحليلات المتعددة (بروتينات أكثر سرية).
آلية اختبار Elispot
في هذه الآلية ، تتم إضافة الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المحددة من السيتوكينات إلى آبار لوحات الميكرولتر في البداية. ثم تضاف الخلايا المرغوبة إلى الآبار. في وقت لاحق ، يتم تحضين الخلايا. أثناء حضانة الخلية ، يُسمح للخلايا بالتفاعل مع أي محفزات وإفراز السيتوكين. السيتوكينات التي تفرزها الخلايا المحتضنة سوف تلتصق بالأجسام المضادة لأن الخلايا محاطة بأجسام مضادة وحيدة النسيلة من السيتوكين.
الشكل 02: فحص Elispot
للكشف عن هذه الأجسام المضادة وحيدة النسيلة الخاصة بالسيتوكين ، تتم إضافة الأجسام المضادة المحددة بيوتينيلاتيد إلى البئر. تلتقط الأجسام المضادة المحددة بيوتينيلاتيد الأجسام المضادة وحيدة النسيلة السيتوكينية في الآبار. علاوة على ذلك ، يتم إضافة اتحادات إنزيم الستربتافيدين إلى الآبار من أجل الارتباط بالأجسام المضادة للكشف. في الخطوة الأخيرة ، يتم إضافة ركائز محددة إلى الآبار. تنتج تفاعلات اتحادات الإنزيمات والركائز بقعًا مميزة في الآبار. تتم قراءة هذه النقاط المميزة على قارئ ELISpot الآلي. في النهاية ، سيؤدي هذا إلى حساب تكرار إفراز السيتوكين.
ما هي أوجه التشابه بين إليسا وإليسبوت؟
- كلاهما مقايسات ممتصة مناعية مرتبطة بالإنزيم.
- كلا الفحصين يكتشفان تحليلات بروتين محددة.
- تستخدم هذه المقايسات أجسامًا مضادة محددة لتحديد تحليلات البروتين.
- كلا الاختبارين يستخدم الإنزيمات والركائز.
- يتم استخدامها كأداة تشخيصية في المختبرات الطبية.
ما هو الفرق بين إليسا وإليسبوت؟
إليسا عبارة عن مقايسة ماصة مناعية مرتبطة بالإنزيم والتي تحدد التركيز الكلي لبروتينات الإشارات المفرزة. من ناحية أخرى ، فإن Elispot عبارة عن مقايسة ماصة مناعية مرتبطة بالإنزيم تقيس خلايا إفراز السيتوكين الفردية. إذن ، هذا هو الفرق الرئيسي بين إليسا وإليسبوت. علاوة على ذلك ، في اختبار إليسا ، يتم تثبيت المستضد أولاً في آبار الميكرولتر. في المقابل ، في اختبار Elispot ، يتم أولاً تثبيت الجسم المضاد في آبار الميكرولتر. وهكذا ، هذا فرق آخر بين إليسا وإليسبوت.
يعرض الرسم البياني أدناه تحليلًا مفصلاً للاختلاف بين إليسا وإليسبوت في شكل جدول.
ملخص - إليسا ضد إليسبوت
إليسا وإليسبوت هما نوعان من مقايسات الممتز المناعي المرتبطين بالإنزيم تستخدمان على نطاق واسع في الطب ، وعلم أمراض النبات ، والتكنولوجيا الحيوية ، والصناعات الدوائية المختلفة. تكتشف إليسا وجود مركب (بروتين) في عينة سائلة باستخدام أجسام مضادة موجهة ضد الربيطة المراد قياسها. اختبار Elispot هو طريقة مستخدمة على نطاق واسع لرصد الاستجابات المناعية. يكتشف خلايا إفراز السيتوكين الفردية باستخدام الأجسام المضادة. إنها تقنية للمقايسة المناعية والبيولوجية. وهكذا هذا هو ملخص الفرق بين إليسا وإليسبوت.
