الفرق الرئيسي بين pBR322 و pUC19 هو أن pBR322 عبارة عن متجه بلازميد يبلغ طوله 4361 زوجًا قاعديًا ، بينما pUC19 عبارة عن متجه بلازميد يبلغ طوله 2686 زوجًا أساسيًا.
ناقل الاستنساخ هو قطعة صغيرة من الحمض النووي يمكن الحفاظ عليها في الكائن الحي بثبات. وهي أيضًا قطعة صغيرة من الحمض النووي يمكن إدخال جزء دنا أجنبي فيها لأغراض الاستنساخ. يحتوي المتجه على ميزات مهمة تسمح بإدخال ملائم لجزء دنا أجنبي في نواقل ، مثل مواقع التقييد ، وعلامة قابلة للتحديد ، وجين المراسل ، وعنصر التعبير. تم إجراء الاستنساخ لأول مرة باستخدام E.القولونية. تشمل نواقل الاستنساخ للإشريكية القولونية البلازميدات والعاثيات والكونوزومات والكروموسومات الاصطناعية البكتيرية (BAC). أكثر النواقل شيوعًا هي البلازميدات المعدلة وراثيًا. pBR322 و pUC19 نوعان من نواقل البلازميد.
ما هو pBR322؟
pBR322 هو ناقل بلازميد. وهي واحدة من أولى نواقل الاستنساخ المستخدمة على نطاق واسع للإشريكية القولونية. تم إنشاء هذا الموجه لأول مرة في عام 1977 في مختبر هربرت بوير بجامعة كاليفورنيا ، سان فرانسيسكو. وهو عبارة عن DNA دائري مزدوج الشريطة يبلغ طوله 4361 زوجًا قاعديًا.
الشكل 01: pBR322
هذا المتجه البلازميدي له ميزات خاصة. عادة ، يحتوي على جينات مقاومة للمضادات الحيوية: الجين bla الذي يشفر مقاومة الأمبيسلين (AmpR) البروتين والجين tetA الذي يشفر مقاومة التتراسيكلين (TetR) بروتين.علاوة على ذلك ، فهو يحتوي على أصل تكرار pMB1. يحتوي ناقل البلازميد هذا أيضًا على جين rop الذي يشفر مقيدًا لرقم نسخة البلازميد. علاوة على ذلك ، يحتوي هذا المتجه على مواقع تقييد فريدة لأكثر من 40 إنزيمًا مقيدًا. أحد عشر موقعًا من مواقع التقييد الأربعين هذه يقع داخل جين TetR. هناك نوعان من مواقع التقييد لأنزيمات التقييد HindIII و ClaI داخل مروج الجين TetR. علاوة على ذلك ، هناك ستة مواقع تقييد مهمة جدًا داخل جين AmpR. pBR322 هو ناقل استنساخ منخفض لرقم النسخ. يوفر ما يقرب من 20 نسخة بلازميد لكل خلية بكتيرية. الوزن الجزيئي للمتجه هو 2.83 × 106دالتون.
ما هو pUC19؟
pUC19 عبارة عن متجه بلازميد يبلغ طوله 2686 زوجًا قاعديًا. إنها واحدة من سلسلة نواقل البلازميد التي أنشأها Joachim Messing وزملاؤه. تم إجراء العمل المبكر على سلسلة البلازميد هذه في جامعة كاليفورنيا. إنه DNA دائري مزدوج الشريطة.
الشكل 02: pUC19
يحتوي ناقل البلازميد هذا أيضًا على ميزات مهمة. يحتوي على جزء طرفي N من جين جلاكتوزيداز (لاكز). كما أن لديها منطقة موقع استنساخ متعدد (MCS). تنقسم هذه المنطقة إلى كودون 6 و 7 من جين لاكز. توفر منطقة MCS العديد من مواقع تقييد نوكليازات داخلية. بالإضافة إلى جين β glactosidase ، يشفر pUC19 أيضًا لجين مقاومة الأمبيسلين (AmpR). علاوة على ذلك ، فإن أصل النسخ المتماثل مشتق من البلازميد pMB1. على الرغم من أن pUC19 صغير الحجم ، إلا أنه يحتوي على عدد نسخ مرتفع (500-700 نسخة لكل خلية بكتيرية). الوزن الجزيئي لهذا المتجه البلازميد هو 1.75 × 106دالتون.
ما هي أوجه التشابه بين pBR322 و pUC19؟
- pBR322 و pUC19 نوعان من نواقل البلازميد.
- هم ناقلات استنساخ شائعة لبكتيريا القولونية.
- كلا متجهي البلازميد لهما نفس أصل شكل النسخ المتماثل للبلازميد pMB1.
- هذه المتجهات لها مواقع تقييد متعددة.
- كلا نواقل البلازميد لهما جين مقاومة الأمبيسلين كعلامة قابلة للتحديد.
ما هو الفرق بين pBR322 و pUC19؟
pBR322 هو ناقل بلازميد يبلغ طوله 4361 زوجًا قاعديًا ، بينما pUC19 عبارة عن متجه بلازميد يبلغ طوله 2686 زوجًا قاعديًا. وبالتالي ، هذا هو الفرق الرئيسي بين pBR322 و pUC19. علاوة على ذلك ، فإن pBR322 عبارة عن ناقل بلازميد ذي رقم نسخة منخفض ، بينما pUC19 عبارة عن ناقل بلازميد ذي رقم نسخ مرتفع.
يعرض مخطط المعلومات أدناه الاختلافات بين pBR322 و pUC19 في شكل جدول للمقارنة جنبًا إلى جنب.
ملخص - pBR322 مقابل pUC19
أكثر ناقلات الاستنساخ شيوعًا للإشريكية القولونية هي بلازميدات معدلة وراثيًا.pBR322 و pUC19 نوعان من نواقل البلازميد. pBR322 هو ناقل بلازميد يبلغ طوله 4361 زوجًا قاعديًا ، بينما pUC19 هو ناقل بلازميد يبلغ طوله 2686 زوجًا قاعديًا. إذن ، هذا هو الفرق الرئيسي بين pBR322 و pUC19.
