الفرق بين بنزوناز و DNase

2024 مؤلف: Alex Aldridge | [email protected]. آخر تعديل: 2023-12-17 13:32

الفرق الرئيسي - بنزوناز مقابل DNase

تدهور الأحماض النووية مهم للعديد من تقنيات البيولوجيا الجزيئية. يستخدم على نطاق واسع في تقنية الحمض النووي المؤتلف للتخلص من الأجزاء غير المرغوب فيها من الحمض النووي والحمض النووي الريبي. يشار إلى الإنزيمات المهينة للحمض النووي باسم نوكلياز ، ويمكن أن تكون من أنواع مختلفة بناءً على الوظيفة المطلوبة. تُعرف نوكليازات الحمض النووي التي تتلف الحمض النووي باسم DNases بينما تُعرف تلك التي تتحلل من الحمض النووي الريبي RNases. تستخدم هذه الإنزيمات في الغالب في التجارب المختبرية حيث يتم إجراء الاختبارات الجزيئية في المختبر لعزل الحمض النووي النقي أو الحمض النووي الريبي أو البروتينات. البنزونات هي نوع من نوكليازات تعمل على تحطيم كل من DNA و RNA بينما DNases تحلل الحمض النووي فقط.هذا هو الفرق الرئيسي بين Benzonase و DNase.

ما هو بنزوناس؟

Benzonase هو نوكلياز هندسي وراثيًا من Serratia marcescens. يتم إنتاج هذا الإنزيم في مضيفات الإشريكية القولونية على نطاق صناعي. بنزوناز قادر على شق الحمض النووي مزدوج الشريطة والحمض النووي الخطي والحمض النووي الدائر والحمض النووي الريبي أحادي السلسلة. وبالتالي فإن بنزوناز مهم تجاريًا. إنزيم بنزوناز هو ثنائي بروتين يحتوي على 245 من الأحماض الأمينية المتطابقة ، حوالي 30 كيلو دالتون مع اثنين من روابط ثاني كبريتيد أساسية. يشق Benzonase الأحماض النووية في نهايته 5 وينتج عنه شظايا مع 5 نهايات مجانية. يمكن للبنزوناز أن يشق الأحماض النووية في أي تسلسل ولكنه يفضل مناطق GC الغنية.

يتم تخزين Benzonase في -20^{0C. وجد أن درجة الحموضة المثلى لنشاط الإنزيم هي 8.0 - 9.2. تشمل تطبيقات بنزوناز تحضير عينة للبروتين 2D الكهربائي للهلام حيث يزيل بنزوناز الأحماض النووية المرتبطة ويزيل ملوثات الحمض النووي من مستحضرات البروتين المؤتلف.كما أنه يستخدم لتقليل لزوجة مستخلصات البروتين ومنع تكتل الخلايا في خليط الخلايا.}

ما هو DNase؟

DNase هو نوكلياز ، إنزيم مائي قادر فقط على شق الحمض النووي المزدوج الشريطة. هناك نوعان رئيسيان من DNases: DNase I و DNase II. يشارك DNase I في شق الحمض النووي المزدوج الشريطة لإنتاج عديد النيوكليوتيدات ذات 5 نهايات حرة. يشارك DNase II في شق الحمض النووي المزدوج الشريطة لإنتاج خيوط متعددة النوكليوتيد ذات 3 نهايات حرة أو متدلية.

DNase أنا

يعمل DNase I عند درجة حموضة مثالية بين 7.0 - 8.0. يعتمد نشاط الإنزيم على العديد من العوامل المساعدة الأيونية التي تشمل ، Ca^{2 +}، Mg^{2 +}أو Mn^{2 + نشاط Mg}2 +^{و Mn}2 +^{يقرر وظيفة DNase I. في وجود Mg}2 +^{، DNase I يشق كل خيط من dsDNA بشكل مستقل. هذا يحدث بطريقة عشوائية. في المقابل ، في وجود Mn}2 + ،^{يشق الإنزيم كلا خيوط الحمض النووي في نفس الموقع تقريبًا.سيؤدي هذا الانقسام إلى إنتاج نوعين من شظايا الحمض النووي ؛ نوع واحد مع نهايات حادة ونوع آخر مع واحد أو اثنين من النيوكليوتيدات المتدلية.}

الشكل 02: DNase

DNase II

وظائف DNase II عند درجة الحموضة المثلى 4.5-5.0 والأيونات المعدنية ثنائية التكافؤ مطلوبة لنشاطها ، على غرار DNase I من المعروف أن آلية DNase II تتكون من ثلاث خطوات رئيسية.

1. يتم إحداث فواصل حبلا مفردة متعددة داخل العمود الفقري للحمض النووي.
2. يتم إنتاج نيوكليوتيدات وأليغنوكليوتيدات قابلة للذوبان في الحمض.
3. يحدث التحول اللوني غير الخطي في المرحلة الأخيرة.

تشمل المثبطات الرئيسية لإنزيم DNase مخلبات المعادن ، والمعادن الانتقالية والمواد الكيميائية مثل كبريتات دوديسيل الصوديوم و β - مركابتوإيثانول.

تشمل التطبيقات الرئيسية لـ DNase تحضير مستخلصات الحمض النووي الريبي خالية من الحمض النووي ومستخلصات البروتين ، وإزالة قالب الحمض النووي أثناء تجارب النسخ في المختبر.

ما هي أوجه التشابه بين Benzonase و DNase؟

• كلاهما من الإنزيمات المتحللة للماء.
• كلاهما نوكلياز.
• كلاهما يشارك عن طريق شق روابط الفسفوديستر للأحماض النووية.
• كلاهما يتطلب درجة حموضة مثالية ودرجات حرارة تخزين للحفاظ على نشاط الإنزيم.
• تشمل مثبطات الإنزيمات عوامل مخلبية ، ومعادن انتقالية ، ومواد كيميائية للمنظفات.
• تركز التطبيقات بشكل أساسي على الحصول على مقتطفات عالية النقاء من DNA و RNA والبروتينات.
• يمكن إنتاج كلا الإنزيمين عبر الهندسة الوراثية.

ما هو الفرق بين Benzonase و DNase؟

بينزوناسي مقابل DNase
Benzonase هو إنزيم قادر على شق الحمض النووي المزدوج ، والحمض النووي الخطي ، والحمض النووي الدائري ، والحمض النووي الريبي.	DNase هو إنزيم قادر على شق الحمض النووي مزدوج الشريطة.
الركيزة للإنزيم
كل من DNA و RNA ركائز للبنزوناز.	DNA هو الركيزة لـ DNase.
هيكل
نطاق الأس الهيدروجيني الأمثل لـ Benzonase هو 7.0 -8.0	نطاقات الأس الهيدروجيني المثلى لـ DNase I هي 7.0 - 8.0 و DNase II هي 4.5 - 5.0.

ملخص - Benzonase vs DNase

تستخدم إنزيمات نوكلياز على نطاق واسع في إجراءات تجريبية مختلفة فيما يتعلق بالبيولوجيا الجزيئية والهندسة الوراثية.بنزوناز ودناز نوعان من نوكليازات. يشارك Benzonase في تحطيم كل من DNA و RNA بينما يشارك DNase في شق الحمض النووي المزدوج الذي تقطعت به السبل. هذا هو الفرق الأساسي بين benzonase و DNase. في الوقت الحاضر ، يتم إنتاج كلا النوعين من نوكلياز من خلال تقنية الحمض النووي المؤتلف والتي تنتج إنزيمات عالية الجودة تم تحسينها لتحقيق أقصى إنتاج.

تنزيل نسخة PDF من Benzonase مقابل DNase

يمكنك تنزيل نسخة PDF من هذه المقالة واستخدامها للأغراض غير المتصلة بالإنترنت وفقًا لملاحظة الاقتباس. يرجى تنزيل نسخة PDF هنا الفرق بين Benzonase و DNase