الفرق الرئيسي - جل التراص مقابل جل الفصل
يتم استخدام المصطلحين جل التراص وجل الفصل في شرح تقنية SDS-PAGE. SDS-PAGE أو رحلان هلام الصوديوم دوديسيل كبريتات-بولي أكريلاميد هو تقنية معملية تُستخدم لفصل جزيئات البروتين بناءً على أوزانها الجزيئية. النظرية الكامنة وراء هذه التقنية هي أن البروتينات ذات الأوزان الجزيئية المختلفة تظهر معدلات هجرة مختلفة ؛ الجزيئات ذات الوزن الجزيئي المنخفض تهاجر بشكل أسرع بينما الجزيئات ذات الوزن الجزيئي العالي تهاجر ببطء. وسيلة الهجرة هي مادة هلامية. هناك نوعان من المواد الهلامية تسمى هلام التراص وجل الفصل.الفرق الرئيسي بين هلام التراص وجل الفصل هو أن الرقم الهيدروجيني لجل التراص هو 6.8 بينما الرقم الهيدروجيني لجل الفصل هو 8.8.
ما هو جل التراص؟
جل التراص عبارة عن جل بولي أكريلاميد منخفض التركيز يتم وضعه على الجزء العلوي من جل حل أكثر تركيزًا (جل فصل) في تقنية SDS-PAGE. يستخدم جل التكديس لتحسين دقة الرحلان الكهربائي. تزداد الدقة بسبب الاختلاف بين تراكيز هلام التراص والهلام الذي يؤثر على البروتينات في العينة. نظرًا لأن تركيز بولي أكريلاميد في هلام التراص منخفض ، فإن حجم المسام أعلى. هذا يساعد أيضًا في زيادة الفصل.
جل التكديس عبارة عن جل بولي أكريلاميد فضفاض مع مسام كبيرة من حوالي 7٪ بولي أكريلاميد. لا تعمل هذه المسام كحاجز كبير لجزيئات البروتين الكبيرة. ومن ثم فإن هذا الجل يؤثر بشكل طفيف على حركة تلك البروتينات. هذا يجعل الفصل وفقًا لحركة البروتين وحجمه عن طريق تركيزهما بين نوعين من المواد الهلامية.
الشكل 01: SDS-PAGE أكريلاميد جل
الرقم الهيدروجيني لجل التراص هو 6.8. الأس الهيدروجيني الخاص به حمضي من نظيره في حل الجل بمقدار 2 وحدة أس هيدروجيني. يشير هذا الرقم الهيدروجيني إلى قوة أيونية أقل وبالتالي مقاومة كهربائية أعلى. هذا يثير حركة البروتينات أكثر من الجسيمات المشحونة الأخرى الموجودة في الهلام.
ما هو جل الفصل؟
جل فصل أو جل حل من SDS-PAGEtechnique هو جل بولي أكريلاميد عالي التركيز يتم وضعه على الجزء العلوي من جل التكديس منخفض التركيز. يحتوي الجل الفاصل على كمية عالية من بولي أكريلاميد (10٪). يتم الحفاظ على الرقم الهيدروجيني لهذا الجل على أنه pH=8.8 ، وهو مستوى pH أعلى من مستوى هلام التراص.
الشكل 02: جهاز الرحلان الكهربائي الهلامي
عندما تصل جزيئات البروتين إلى الجل الفاصل ، يتم إبطاء هجرة تلك الجزيئات لأن الجل الفاصل هو جل عالي التركيز ذو حجم مسام صغير يمكن أن يكون بمثابة حاجز كبير لحركة جزيئات البروتين. يسمح هذا الإبطاء للبروتينات الأخرى بالانتقال ببطء للحاق بالركب ، مما يؤدي إلى وجود نطاق ضيق ومركّز بين الهلامين.
ما العلاقة بين جل التكديس وجل الفصل؟
كلا النوعين جل التكديس وجل الفصل يستخدمان في نفس الجهاز
ما هو الفرق بين جل التكديس وجل الفصل؟
جل التراص مقابل جل الفصل |
|
| جل التراص عبارة عن جل بولي أكريلاميد منخفض التركيز يتم وضعه على الجزء العلوي من جل حل أكثر تركيزًا (جل فصل) في تقنية SDS-PAGE. | جل فصل أو جل حل لتقنية SDS-PAGE هو جل بولي أكريلاميد عالي التركيز يتم وضعه على الجزء العلوي من جل تكديس منخفض التركيز. |
| الموضع | |
| يتم وضع هلام التراص على هلام حل (فصل). | يتم وضع هلام الفصل في الجزء السفلي من الحاوية المستخدمة للهلام الكهربائي. |
| تركيز | |
| تركيز جل التراص مرتفع. | تركيز هلام الفصل منخفض. |
| محتوى بولي أكريلاميد | |
| يحتوي جل التراص على حوالي 7٪ بولي أكريلاميد. | يحتوي الجل المنفصل على حوالي 10٪ بولي أكريلاميد. |
| الرقم الهيدروجيني | |
| الأس الهيدروجيني لجل التراص هو 6.8. | الرقم الهيدروجيني للجل الفاصل هو 8.8. |
| حجم المسام | |
| أحجام المسام الكبيرة موجودة في هلام التراص. | أحجام المسام الصغيرة موجودة في فصل الهلام. |
| القرار | |
| التراص هلام يعطي دقة أفضل | هلام الفصل يعطي دقة ضعيفة. |
ملخص - جل التراص مقابل جل الفصل
التراص والهلام الفاصل نوعان من البولي أكريلاميد الهلامات المستخدمة للحصول على فصل أفضل لجزيئات البروتين في عينة معينة.الفرق بين هلام التراص وجل الفصل هو أن الرقم الهيدروجيني لجل التراص هو 6.8 بينما الرقم الهيدروجيني لجيل الفصل هو 8.8.
