الفرق الرئيسي - RNASE A مقابل RNASE H
نوكليازات الريبونيز هي نوكليازات تحلل الحمض النووي الريبي على وجه التحديد إلى وحدات أصغر. يمكن تقسيمها إلى فئتين ؛ نوكليازات endoribonucleases و exoribonucleases. نوكلياز Endoribonuclease هو نوكلياز داخلي يمكنه إما أن يتحلل من الحمض النووي الريبي المفرد الذي تقطعت به السبل أو مزدوج الجديلة. يشق روابط phosphodiester داخل سلسلة RNA polynucleotide. الأمثلة هي RNase A و RNase III و RNase T1 و RNase P و RNase H. Exoribonuclease هو نوكلياز خارجي يتحلل من الحمض النووي الريبي عن طريق إزالة النيوكليوتيدات الطرفية من 5 أو 3 من جزيء RNA. الأمثلة هي RNase R و RNase II و RNase D و RNase PH.يتمثل الاختلاف الرئيسي بين RNASE A و RNASE H في أن RNase A هو ريبونوكلياز البنكرياس الذي يحلل على وجه التحديد الحمض النووي الريبي أحادي السلسلة إلى مكونات أصغر بينما RNase H هو إنزيم غير محدد يشق الحمض النووي الريبي في هجين RNA-DNA إلى وحدات أصغر عبر آلية التحلل المائي.
ما هو RNASE A؟
RNase A عبارة عن ريبونوكلياز البنكرياس الذي يشق على وجه التحديد بقايا السيتوزين واليوراسيل غير المزاوجة في نهاية 3 'من الحمض النووي الريبي أحادي السلسلة. يعمل RNase H بتركيز ملح أعلى (0.3M أو أعلى تركيز كلوريد الصوديوم). يتكون التفاعل المائي من خطوتين. إنه يشكل 3 'منتج فسفري عبر 2' ، 3 'وسيط أحادي الفوسفات الحلقي. على الرغم من أنه خاص بـ RNA أحادي الشريطة بتركيز أعلى من الملح ، إلا أنه يمكن أيضًا أن يتحلل من RNA مزدوج الشريطة و RNA في هجين RNA-DNA عند تركيز أقل من NaCl (أقل من 0.3M NaCl).
قام بروس ميريفيلد بتصنيع هذا الإنزيم أولاً. إنزيم RNase A هو إنزيم شائع جدًا في الأبحاث الجزيئية. RNase A البقري هو مثال على RNase A. وهو أحد أقوى الإنزيمات المستخدمة في المختبر. لا يحتاج هذا الإنزيم إلى عامل مساعد لنشاطه. إنه إنزيم عالي الحرارة. RNase A هو أول إنزيم وثالث بروتين تم اكتشاف تسلسل صحيح للأحماض الأمينية له. هذا الإنزيم صغير جدًا ويحتوي على 124 حمض أميني وكتلة جزيئية تبلغ 12600 دالتون. وله أربع بقايا من الهيستيدين (له 12 و 119 التي تنطوي على تفاعل تحفيزي).
الشكل 01: RNase A
يمكن عزل RNase A بغلي عينة خام. عندما يغلي ، تتحلل جميع الإنزيمات الأخرى المتبقية RNase A. RNase A هو إنزيم مستقر بشكل مذهل. هذا الإنزيم يثبط مع بروتين مثبط الريبونوكلياز ، ومركبات المعادن الثقيلة ويوريدين فانادات.
ما هو RNase H؟
RNase H هو إنزيم ريبونوكلياز غير محدد يمكنه تحطيم الحمض النووي الريبي في هجين RNA-DNA عبر تفاعل التحلل المائي. يشق RNase H 3’- رابطة O-P من RNA في هجين RNA-DNA. في النهاية تنتج 3'OH و 5 'المنتجات النهائية الفوسفات. في تكرار الحمض النووي ، يلعب دورًا محوريًا عن طريق إزالة RNA التمهيدي بعد تشكيل خيوط DNA جديدة. في الظروف المختبرية ، فإنه يحط على وجه التحديد RNA في هجين RNA-DNA ولكن ليس DNA و RNA غير المهجن. وعادة ما يستخدم هذا الإنزيم لتدمير قالب الحمض النووي الريبي بعد تشكيل أول حبلا مكمل للحمض النووي أثناء تخليق (كدنا).
الشكل 02: RNase H
يستخدم RNase H أيضًا في فحوصات حماية نوكلياز. يمكن أيضًا دمجها في إزالة ذيل بولي A من mRNA. RNase H لديه القدرة على تدمير الحمض النووي الريبي غير المشفر داخل وخارج الخلية.الأيونات المعدنية مطلوبة كعوامل مساعدة لهذا النشاط البروتيني. يمكن استخدام مخلب (EDTA) لتثبيط إنزيم RNase H.
ما هي أوجه التشابه بين RNASE A و RNASE H؟
- كلاهما بروتين في الطبيعة.
- كلاهما نوكلياز داخلي
- كلاهما يمكن أن يتحلل من الحمض النووي الريبي.
- كلاهما يؤدي تفاعلات مائية.
- تستخدم المختبرات الجزيئية كلاهما.
ما هو الفرق بين RNASE A و RNASE H؟
RNASE A مقابل RNASE H |
|
| RNase A هو ريبونوكلياز البنكرياس الذي يشق على وجه التحديد الطرف الثالث من بقايا السيتوزين واليوراسيل غير المتزاوجة من الحمض النووي الريبي أحادي الشريطة بتركيز أعلى من الملح. | RNase H هو إنزيم ريبونوكلياز غير محدد يمكنه تحطيم الحمض النووي الريبي في هجين RNA-DNA عبر تفاعل التحلل المائي. |
| طبيعة انشقاق الحمض النووي الريبي | |
| RNase A يشق على وجه التحديد الحمض النووي الريبي أحادي الشريطة بتركيز ملح أعلى. | RNase H يشق RNA في RNA- هجين DNA. |
| الحاجة إلى عوامل مساعدة للنشاط | |
| RNase A لا يحتاج إلى عوامل مساعدة لنشاطه. | RNase H يحتاج إلى أيونات المعادن كعوامل مساعدة لنشاطها. |
| مثبطات نشاط البروتين | |
| بروتين مثبط ريبونوكلياز ، معقدات معدنية ثقيلة ويوريدين فانادات يثبط نشاط RNAse A. | A chelator (EDTA) يثبط نشاط RNase H. |
| إزالة RNA التمهيدي في تكرار الحمض النووي | |
| RNase A لا يستخدم لإزالة RNA التمهيدي في تكرار الحمض النووي. | يستخدمRNase H لإزالة RNA التمهيدي في تكرار الحمض النووي |
| إزالة قالب الحمض النووي في تركيب الحمض النووي التكميلي (C-DNA) | |
| لا يتم استخدام RNase A لإزالة قالب RNA أثناء تخليق DNA (C-DNA) التكميلي. | يستخدم RNase H لإزالة قالب RNA أثناء تخليق DNA (C-DNA) التكميلي. |
| إزالة Poly-A-Tail في mRNA المهجن إلى Oligo (dt) | |
| RNase A لا يستخدم لإزالة "poly-A tail" في mRNA المهجن إلى oligo (dt). | RNase H يستخدم لإزالة "poly-A tail" في mRNA المهجن إلى oligo (dt) |
ملخص - RNASE A مقابل RNASE H
الريبونوكليازات هي إنزيمات نوكلياز التي لديها القدرة على شطر الحمض النووي الريبي إلى وحدات أصغر. هم نوعان. نوكليازات endoribonucleases و exoribonucleases. نوكلياز Endoribonuclease هو نوكلياز داخلي لديه القدرة على تحطيم الحمض النووي الريبي أحادي أو مزدوج الشريطة. وهو يشق رابطة الفوسفوديستر داخل سلسلة بولينوكليوتيد الحمض النووي الريبي. RNase A و RNase H نوعان من نوكليازات داخلية. RNase A هو ريبونوكلياز البنكرياس الذي يشق على وجه التحديد بقايا السيتوزين واليوراسيل غير المتزاوجة عند نهاية 3 بوصات من الحمض النووي الريبي أحادي السلسلة بتركيز ملح أعلى. RNase H هو إنزيم ريبونوكلياز غير محدد يمكنه تحطيم الحمض النووي الريبي في هجين RNA-DNA عبر تفاعل التحلل المائي. هذا هو الفرق بين RNase A و RNase H.
قم بتنزيل ملف PDF RNASE A مقابل RNASE H
يمكنك تنزيل نسخة PDF من هذه المقالة واستخدامها للأغراض غير المتصلة بالإنترنت وفقًا لملاحظة الاقتباس. يرجى تنزيل نسخة PDF هنا الفرق بين RNASE A و RNASE H
