الاختلاف الرئيسي بين BL21 و DH5 Alpha هو أن BL21 عبارة عن خلية E. coli المختصة التي تعاني من نقص الأنزيم البروتيني والتي تم تصميمها وراثيًا وتستخدم بشكل أساسي للتعبير عن البروتين ، في حين أن DH5 Alpha عبارة عن خلية E. لتحويل البلازميد.
ه. coli هي واحدة من الكائنات الحية الشهيرة المختارة لإنتاج البروتين المؤتلف. لقد أصبحت منصة التعبير الأكثر شعبية على مر السنين. كما أنها تستخدم كمصنع للخلايا. BL21 و DH5 Alpha هما نوعان من خلايا E. coli المعدلة وراثيًا المستخدمة حاليًا لتعبير البروتين وتحويل البلازميد ، على التوالي.
ما هو BL21؟
BL21 عبارة عن خلية كولي E مختصة ومُصممة وراثيًا تعاني من نقص الأنزيم البروتيني وتستخدم أساسًا للتعبير عن البروتين. الإشريكية القولونية BL21 هي خلية بكتيرية مشتقة من السلالة B. لديها عيوب في Lon protease و ompT الخارجي للبروتياز. يستخدم بشكل شائع للتعبير عن البروتين المؤتلف لأنه عادة ما يجلب الاستقرار للبروتينات المعبر عنها. يعتبر BL21 مفيدًا للتعبير عن البروتين باستخدام pCold I-IV DNA و pCold TF DNA. لكن خلية الإشريكية القولونية المختصة هذه ليست مخصصة لنظام التعبير عن البروتين باستخدام محفز T7 مثل نظام PET. السبب وراء ذلك هو أن BL21 لا تعبر عن بوليميريز T7 RNA. بالإضافة إلى ذلك ، لا ينصح باستخدامه لبناء أو تحضير البلازميد لأنه لا يحتوي على طفرة recA.
الشكل 01: BL21
تم وصفBL21 لأول مرة بواسطة Studier في عام 1986 بعد تعديلات مختلفة على الخط B. تعاني خلايا BL21 من نقص في إنزيم LON protease ، الذي يؤدي إلى تدهور العديد من البروتينات الأجنبية. علاوة على ذلك ، فإنه يفتقد جينًا آخر يرمز إلى البروتيز الغشاء الخارجي (OmpT) والذي تتمثل وظيفته في تحطيم البروتينات خارج الخلية. يؤدي نقص هذه البروتينات إلى إنتاج ناجح للبروتين الأجنبي في خلايا الإشريكية القولونية BL21. علاوة على ذلك ، تمنع طفرة hsdSB في هذه الخلايا مثيلة الحمض النووي الأجنبي وتعطيل خلايا BL21.
ما هو DH5 Alpha؟
DH5 Alpha عبارة عن خلية E. coli مختصة وراثيا مع طفرة recA1 التي تستخدم بشكل أساسي لتحويل البلازميد. تم تصميم خلايا DH5 Alpha E. coli وراثيًا بواسطة عالم الأحياء الأمريكي دوغلاس هاناهان لزيادة كفاءة التحول إلى الحد الأقصى. تحتوي خلية DH5 Alpha على ثلاث طفرات متميزة: recA1 و endA1 و lacZΔM15. recA1 هي طفرة أحادية النقطة تحل محل الجليسين 160 مع بقايا حمض الأسبارتيك في بولي ببتيد recA.تعمل هذه الطفرة على تعطيل نشاط إعادة التركيب وتثبيط إعادة التركيب المتماثل. تعمل طفرة endA1 على تعطيل نوكلياز داخل الخلايا مما يمنعها من إفساد البلازميد المُدخَل.
الشكل 02: DH5 Alpha
علاوة على ذلك ، تتيح طفرة lacZΔM15 فحص الخلايا المحولة باللونين الأزرق والأبيض. هذه الخلايا هي خلايا مختصة. غالبًا ما تستخدم مع تحويل كلوريد الكالسيوم لإدخال البلازميد المطلوب. تم تحديد من خلال الأبحاث الحديثة أن خلية ألفا DH5 باستخدام طريقة هاناهان كانت الخلية الأكثر كفاءة في التحول البلازميد.
ما هي أوجه التشابه بين BL21 و DH5 Alpha؟
- BL21 و DH5 Alpha هما نوعان من E.
- كلاهما خلايا مختصة.
- إنها تتكون من طفرات متميزة.
- كلاهما ليس لهما موطن طبيعي.
- تستخدم لأغراض معملية مثل دراسات التعبير وإجراءات الاستنساخ.
ما هو الفرق بين BL21 و DH5 Alpha؟
BL21 هي خلية الإشريكية القولونية المختصة والمعدلة وراثيًا والتي تعاني من نقص الأنزيم البروتيني وتستخدم أساسًا للتعبير عن البروتين. من ناحية أخرى ، فإن DH5 Alpha عبارة عن خلية E. coli ذات كفاءة وراثية مع طفرة recA1 تستخدم بشكل أساسي لتحويل البلازميد. إذن ، هذا هو الفرق الرئيسي بين BL21 و DH5 Alpha. علاوة على ذلك ، لا تحتوي خلية BL21 E. coli على طفرة recA1 ، بينما تحتوي خلية DH5 Alpha E. coli على طفرة recA1.
يسرد الرسم البياني التالي الاختلافات بين BL21 و DH5 Alpha في شكل جدول.
ملخص - BL21 مقابل DH5 Alpha
تم تطوير السلالات غير المسببة للأمراض من الإشريكية القولونية وراثيًا من قبل العلماء لدراسات التعبير المختبرية وأغراض الاستنساخ. BL21 و DH5 Alpha هما نوعان من خلايا الإشريكية القولونية المعدلة وراثيًا. يستخدم BL21 بشكل أساسي في دراسات التعبير عن البروتين. من ناحية أخرى ، يستخدم DH5 Alpha بشكل أساسي لأغراض تحويل البلازميد. وبالتالي ، هذا هو ملخص الفرق بين BL21 و DH5 Alpha.
