الفرق الرئيسي - HPLC مقابل LCMS
دعونا نلقي نظرة أولاً على معنى HPLC و LCMS قبل تحليل الفرق بين HPLC و LCMS. الكروماتوغرافيا هي تقنية فصل في التحليل الكيميائي حيث يتم فصل مكونات العينة أثناء المرور عبر وسط كروماتوغرافي. كما يتضمن التفاعل مع العينة ، والمرحلة الثابتة ، والمرحلة المتنقلة. يرمز HPLC إلى كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء ، ويستخدم كطريقة كروماتوغرافيا سائلة في الكيمياء التحليلية. تم تطوير الجمع بين الكروماتوغرافيا السائلة والتحليل الطيفي للكتلة (LCMS) للتحليل الكمي للجزيئات الحيوية المختارة وهو إجراء فحص عالي الحساسية ودقيق ومحدد مقارنة بـ HPLC.هذا هو الفرق الرئيسي بين HPLC و LCMC. ستقدم لك هذه المقالة HPLC و LCMC التي تتعامل مع التحليل الكيميائي وتناقش الاختلافات بين HPLC و LCMS.
ما هو HPLC؟
الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC) هي تقنية فصل شائعة في الكيمياء التحليلية. يتم استخدامه بشكل أساسي لفصل المكونات ، لتحديد وتقدير كل مكون في الخليط. في وقت سابق ، كانت هذه الطريقة تُعرف بالكروماتوغرافيا السائلة عالية الضغط لأنها تعتمد على المضخات لتدفق مذيب سائل مضغوط يشتمل على خليط العينة عبر عمود معبأ بمادة ممتصة صلبة. يتفاعل كل مكون في خليط العينة بشكل مختلف مع المادة الماصة الصلبة ، مما يؤدي إلى معدلات تدفق مختلفة لمكونات مختلفة. هذا يمكن أن يؤدي إلى فصل المكونات لأنها تتدفق خارج العمود HPLC.
تم استخدام HPLC في تطبيقات مختلفة مثل تحليل مستويات فيتامين (د) في الدم ، وتعاطي المخدرات بشكل غير قانوني للرياضيين من خلال الكشف عن بقايا الأدوية في بولهم ، وفرز مكونات عينة بيولوجية معقدة لأغراض البحث والتحليل وتصنيع الأدوية.
ما هو LCMS؟
اللوني السائل - مقياس الطيف الكتلي (LCMS) هي تقنية تحليلية تجمع بين قدرات الفصل الفيزيائي للكروماتوغرافيا السائلة مع قدرات التحليل الكتلي لمطياف الكتلة (MS). الكروماتوغرافيا السائلة هي تقنية فصل ، ويتم استخدام مقياس الطيف الكتلي لتحليل نسبة الكتلة إلى الشحن للجسيمات المشحونة. عادةً ما يتم تحقيق الفصل المادي بواسطة HPLC وبدلاً من ذلك ، يُعرف LCMS أيضًا باسم HPLC-MS. LCMS هي تقنية تحليلية سائدة لديها دقة وحساسية وخصوصية عالية جدًا مقارنة بـ HPLC. وبالتالي ، فهي مفيدة في العديد من التطبيقات مثل أغراض البحث ، وتحليل الأدوية ، وتحليل الأغذية ، وما إلى ذلك ، يتم استخدام LCMS بشكل أساسي لفصل ، وكشف ، وتحديد ، وقياس الخصائص الكيميائية الحيوية لعينة معينة في وجود مخاليط كيميائية معقدة.
ما هو الفرق بين HPLC و LCMC؟
اختصار وتعريف HPLC و LCMC
HPLC: يرمز HPLC إلى كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء. إنها تقنية فصل تُستخدم بشكل أساسي لفصل المكونات ، لتحديد وتحديد كل مكون في الخليط.
LCMS: يرمز LCMS إلى اللوني السائل وقياس الطيف الكتلي. إنها تقنية تحليلية تجمع بين قدرات الفصل الفيزيائي للكروماتوغرافيا السائلة مع قدرات التحليل الكتلي لمطياف الكتلة (MS).
خصائص HPLC و LCMC
التصنيف
HPLC: هذه طريقة كروماتوغرافيا سائلة فقط.
LCMS: هذا هو مزيج من طريقة اللوني السائل وطريقة قياس الطيف الكتلي.
كفاءة
HPLC: مقارنة بـ LCMS ، فإن تحليل HPLC أقل كفاءة وأبطأ.
LCMS: مقارنة بـ HPLC ، فإن تحليل LCMS فعال وأسرع.
حساسية
HPLC: مقارنة بـ LCMS ، فإن تحليل HPLC أقل حساسية.
LCMS: مقارنة بـ HPLC ، فإن تحليل LCMS أكثر حساسية.
خصوصية
HPLC: مقارنة بـ LCMS ، فإن تحليل HPLC أقل تحديدًا.
LCMS: مقارنة بـ HPLC ، فإن تحليل LCMS أكثر تحديدًا.
دقة
HPLC: يعطي HPLC نتائج أقل دقة من LCMS لتحديد بعض المواد الكيميائية.
LCMS: يعطي LCMS نتائج أكثر دقة من HPLC لتحديد بعض المواد الكيميائية.
المكون
HPLC: يمكن اعتبار HPLC أحد مكونات LCMS.
LCMS: لا يمكن اعتبار LCMS أحد مكونات HPLC.
مصدر أيون
HPLC: مصدر أيون غير موجود في جهاز HPLC.
LCMS: مصدر أيون موجود في أداة LCMS.
التطبيقات
HPLC: يمكن تحليل الأيونات والبوليمرات والجزيئات العضوية والجزيئات الحيوية باستخدام HPLC.
LCMS: يمكن تحليل الجزيئات العضوية والجزيئات الحيوية. على النقيض من HPLC ، يمكن استخدام LCMS لفحص الخلائط التي لم يتم حلها بشكل كامل.
العملية
HPLC: الرسم التخطيطي لأداة HPLC موضح في الشكل 1 ، وعادة ما يتضمن جهاز أخذ عينات تلقائي ، ومضخات ، وكاشف. يقوم جهاز أخذ العينات بإدخال خليط العينة إلى الطور المتحرك (خليط مضغوط من المذيبات مثل الماء والأسيتونتريل و / أو الميثانول) الذي ينقله إلى العمود. توفر المضخات التدفق المطلوب وتكوين الطور المتحرك عبر العمود. يُملأ العمود بمادة الامتصاص ، وهي عبارة عن جسيمات صلبة حبيبية مثل السيليكا أو البوليمرات. ينتج الكاشف إشارة تتناسب مع كمية وجود مكون العينة في العمود ، مما يسمح بالتحليل الكمي لمكونات العينة المختارة. يتم التحكم في أداة HPLC ، ويتم توفير تحليل البيانات بواسطة معالج دقيق رقمي وبرنامج المستخدم.
الشكل 1: رسم تخطيطي لأداة HPLC
LCMS: الرسم التخطيطي لأداة LCMS مُدرج في الشكل 2. يتم إدخال مستخلص العينة في العمود المكون من HPLC. يحتفظ هذا العمود بعينات الأيض بناءً على الأحرف الفيزيائية ، وتتدفق المستقلبات المختلفة إلى مطياف الكتلة في فترات زمنية مختلفة. يستخدم التحليل الطيفي الكتلي لتقييم كتل الجسيمات ، ولتحديد الترتيب الأولي للجزيء ، ولتوضيح هياكل الجزيئات. ومع ذلك ، يجب تأين العينة لتوليد جزيئات مشحونة من أجل تحديد نسب الكتلة إلى الشحن. لذلك ، بدلاً من أدوات HPLC ، يتكون LCMS من ثلاث وحدات إضافية مثل مصدر الحديد ومحلل الكتلة والكاشف. يمكن لمصدر أيوني تحويل عينة الطور الغازي إلى أيونات ومحلل كتلة يجمع الأيونات حسب كتلها باستخدام المجالات الكهرومغناطيسية.أخيرًا ، يقوم الكاشف بتحديد القيم وتقديم البيانات لكل أيون موجود في العينة. يمكن استخدام تقنية LCMS لكل من التطبيقات النوعية والكمية.
الشكل 2: رسم تخطيطي لأداة LCMS
في الختام ، HPLC هي طريقة كروماتوغرافيا سائلة بينما LCMS عبارة عن مزيج من كروماتوجرافيا السائل وقياس الطيف الكتلي. تتمتع كلتا تقنيتي التحليل هاتين بخصائص مختلفة ، ولكن يمكن استخدامهما لتحديد التركيبات الغذائية ، والمستحضرات الصيدلانية ، والجزيئات النشطة بيولوجيًا الأخرى وقياسها.
