الفرق الرئيسي - المسبار مقابل التمهيدي
المسبار الجزيئي عبارة عن جزء صغير من DNA أو RNA يتعرف على التسلسلات التكميلية في DNA أو RNA ويسمح بتحديد التسلسل المستهدف. التمهيدي هو امتداد صغير من الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي الذي يعمل كنقطة انطلاق لتخليق الحمض النووي. يتم تهجين المواد الأولية والمجسات مع النيوكليوتيدات التكميلية لقالب الحمض النووي أو الحمض النووي المستهدف. ومع ذلك ، فإن الاختلاف الرئيسي بين المسبار والتمهيدي هو أن البادئات ضرورية لتكرار الحمض النووي بينما التحقيقات ضرورية للكشف عن تسلسل معين في عينة الحمض النووي.
ما هو المسبار؟
المسبار هو جزء صغير من DNA أو RNA يستخدم لاكتشاف الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي المستهدف في العينة عن طريق التهجين الجزيئي.تُعرف أيضًا باسم الواسمات الجزيئية. يمكن أن يختلف طول المجس (من 100 إلى 1000 قاعدة) ، وتكون نيوكليوتيدات المسبار مكملة لجزء من التسلسل المستهدف. لسهولة الكشف ، يتم تمييز المجسات بالنظائر المشعة أو الأصباغ الفلورية أو الأجسام المضادة. ترتبط المجسات بالقواعد التكميلية للتسلسل المستهدف وتكشف عن وجود الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي المستهدف في العينة. هناك طريقتان رئيسيتان لوضع العلامات على المجسات: وضع العلامات على النهاية وترجمة النك. يتم تصنيف المجسات إلى أنواع مختلفة بما في ذلك مجسات الحمض النووي ، مجسات الحمض النووي الريبي ، مجسات cDNa ومسبار أليغنوكليوتيدات الاصطناعية ، ويتم تحضيرها باستخدام تقنيات مختلفة.
المجسات هي أدوات مهمة في العديد من المجالات الميكروبية والجزيئية مثل علم الفيروسات ، وعلم الأمراض الشرعي ، واختبار الأبوة ، وبصمات الحمض النووي ، والكشف عن الأمراض الوراثية ، و RFLP ، والوراثة الخلوية الجزيئية ، والتهجين في الموقع ، وما إلى ذلك.
الشكل 01: المسبار المسمى الفلورسنت المستخدم في FISH لاكتشاف مسببات الأمراض
ما هو البرايمر؟
التمهيدي عبارة عن جزء قصير من DNA أو RNA يعمل كبادئ لتخليق الحمض النووي. يضيف إنزيم بوليميريز الحمض النووي النيوكليوتيدات إلى مجموعة 3 'OH من تسلسل التمهيدي ويصنع الشريط الجديد المكمّل لقالب الحمض النووي. الاشعال عبارة عن شظايا قصيرة جدًا بطول 18 إلى 20 نيوكليوتيد. يتم تصنيعها كيميائيا في المختبر لتضخيم الحمض النووي في المختبر (PCR). يمكن أن تحتوي المواد الأولية على أي تسلسل من النيوكليوتيدات حيث تم تصميمها من قبل المستخدم. يتم تصنيعها لتتناسب مع القواعد التكميلية للقالب DNA. لذلك ، يمكن أن تحتوي على أي سلسلة من النيوكليوتيدات. تعتبر المواد الأولية ذات أهمية قصوى لتكرار الحمض النووي لأن بوليميراز الحمض النووي لا يمكنه توليف الحمض النووي الجديد دون وجود قطعة موجودة مسبقًا من الحمض النووي. عند تصميم البادئات لـ PCR ، يجب مراعاة الأمور التالية:
- يجب أن تحتوي البادئات على النيوكليوتيدات التكميلية للطرف المحيط بالحمض النووي الذي يريد التضخيم.
- يجب أن تحتوي البرايمر على درجة حرارة انصهار بين 55-650C
- يجب أن يكون المحتوىG و C بين 50 إلى 60٪.
يتم استخدام اثنين من البادئات في PCR للأمام والخلف لتكرار كلا خيوط عينة الحمض النووي. تستخدم البادئات بشكل شائع لأداء تسلسل تفاعل البوليميراز المتسلسل والحمض النووي.
الشكل 02: التلدين التمهيدي في PCR
ما هو الفرق بين Probe و Primer؟
المسبار مقابل التمهيدي |
|
| المسبار هو جزء صغير من DNA / RNA يستخدم لاكتشاف وجود التسلسل المستهدف في عينة عن طريق التهجين الجزيئي. | التمهيدي هو امتداد صغير من الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي الذي يعمل كنقطة انطلاق لتكرار الحمض النووي. |
| الوظيفة | |
| هذا يكتشف وجود تسلسل محدد في عينة DNA أو RNA. | هذا بمثابة نقطة انطلاق لتخليق الحمض النووي. |
| الطول | |
| يمكن أن يكون الطول في حدود 100-1000 قاعدة | الطول بشكل عام حوالي 18-20 قاعدة |
| ملزمة مع تسلسل تكميلي | |
| يتهجين المسبار مع القواعد التكميلية للتسلسل المستهدف | التمهيدي يصلب مع القواعد التكميلية لخيوط الحمض النووي. |
| تسمية | |
| تم تصنيف المجسات لسهولة الكشف | لا يتم تصنيف البرايمر بشكل عام |
| استخدم في PCR | |
| لا تستخدم المجسات في PCR | تستخدم البرايمر في PCR |
ملخص - دقق مقابل التمهيدي
المسبار هو جزء صغير من تسلسل الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي يمكن تهجينه بالنيوكليوتيدات التكميلية لاكتشاف التسلسل المستهدف في العينة. يتم تمييز المجسات بطريقة إشعاعية أو مناعية أو فلورية لمعرفة وجود تسلسل الهدف. التمهيدي عبارة عن جزء صغير جدًا من DNA أو RNA يعمل كنقطة انطلاق لتضخيم الحمض النووي في المختبر. يحدد DNA polymerase 3 'OH Group Primer ويبدأ في بناء حبلا جديد مكمل للقالب. تعمل المجسات والبرايمر بالمثل عن طريق التهجين مع النيوكليوتيدات التكميلية.وبالتالي ، فإن الاختلاف الرئيسي بين المسبار والتمهيدي هو وظيفتهما الأساسية.
