الفرق الرئيسي - المحولات مقابل المؤتلف
إعادة التركيب والتحول هما خطوتان حاسمتان في الهندسة الوراثية ، حيث يتم تعديل خصائص الكائن الحي عن عمد من خلال التلاعب بمواده الجينية. إعادة التركيب هي عملية يتم فيها دمج الحمض النووي الغريب في جينوم ناقل ويتم تكوين جزيء الحمض النووي المؤتلف. التحول هو الخطوة التالية التي يتم فيها إدخال الجزيء المؤتلف في الكائن الحي المضيف. تسهل الخلية المضيفة أو الكائن الحي التعبير عن الجزيء المؤتلف. يتمثل الاختلاف الرئيسي بين المحولات والمواد المؤتلفة في أن المحولات هي الخلايا أو الكائنات الحية التي تأخذ الجزيء المؤتلف بالداخل وتسهل التعبير بينما المؤتلفات هي النواقل التي تسمح بإدخال الحمض النووي الغريب في جينومه ونقله إلى محولات مضيفة للتعبير.
ما هي المتحولات؟
المتحولات هي الخلايا أو الكائنات الحية التي يتم فيها أخذ الحمض النووي المؤتلف للتعبير. تُستخدم البكتيريا بشكل شائع ككائنات مضيفة في الهندسة الوراثية نظرًا لسهولة نموها وتكاثرها والتعامل معها في ظل ظروف المختبر ، كما أن عملية التحول سهلة مقارنة بالكائنات الأخرى. البكتيريا المضيفة الأكثر شيوعًا المستخدمة في الهندسة الوراثية هي بكتيريا E coli.
أثناء عملية التحول ، يتم حث الخلايا المضيفة على امتصاص المواد المؤتلفة. ومع ذلك ، فإن بعض الخلايا المضيفة لا تتناول الجزيئات المؤتلفة. تُعرف باسم غير المحولات والخلايا التي تحتوي على جزيئات DNA المؤتلفة في الداخل تُعرف بالمحولات. يتم اختيار المحولات من غير المحولات باستخدام علامات مختارة في البيولوجيا الجزيئية. يتم إدخال علامات مختارة في جينوم الناقل مع إدراج الحمض النووي. الواسمات المختارة شائعة الاستخدام هي جينات مقاومة للمضادات الحيوية.تسهل جينات العلامة تمايز المحولات وتستمر في العملية. بعد عملية التحول ، تزرع البكتيريا في وسط يحتوي على مضاد حيوي. فقط المحولات قادرة على النمو على هذا الوسط لأنها تمتلك المؤتلف بالداخل.
بمجرد تحويل جزيء الحمض النووي المؤتلف داخل الكائن الحي المضيف ، يمكن إما دمج الحمض النووي الغريب في جينوم الخلية المضيفة أو يظل غير متكامل في السيتوبلازم. ومع ذلك ، يحدث تعبير وتكرار الحمض النووي الغريب في الكائن الحي المضيف وينتج النتيجة المرجوة من العملية.
ما هي المؤتلفات؟
المؤتلف هو كائن حي أو خلية تمتلك جينوم معاد تجميعه يحتوي على DNA غريب. المؤتلف هو نتيجة لعملية الهندسة الوراثية.يتم بناؤها بشكل مصطنع في المختبر عن طريق إدخال الجينات ذات الأهمية وتعديل الجينوم. غالبًا ما تعمل البلازميدات والعاثيات البكتيرية كمواد مؤتلفة في الهندسة الوراثية. لديها الوهم من الحمض النووي المختلفة. يحمل جزيء الحمض النووي المؤتلف الحمض النووي الغريب إلى الكائن الحي المضيف ويجعله يعبر عن المنتج المطلوب ويشكله.
جزيئات المؤتلف يتم بناؤها باستخدام نوكليازات تقييدية و ligases DNA. يتم فصل جزء الحمض النووي المطلوب عن الكائن الأصلي وإدخاله في الناقل لجعل المادة المؤتلفة من أجل التحول. يجب أن يتم قطع الجين المعني وفتح كائن ناقل باستخدام نفس إنزيم التقييد لإنشاء نهايات لزجة متوافقة لربطها معًا. بمجرد دمج الحمض النووي الغريب في جينوم الناقل ، يُعرف باسم المؤتلف أو جزيء الحمض النووي المؤتلف.
الشكل 02: الحمض النووي المؤتلف
ما هو الفرق بين المتحولات و المؤتلف؟
المتحولون مقابل المؤتلف |
|
| المحولات هي الخلايا التي تحتوي على جزيء DNA المؤتلف بداخلها. | المؤتلفات هي الجزيئات الحاملة التي تحتوي على DNA غريب مدرج في الجينوم الخاص. |
| التعبير عن الحمض النووي الأجنبي | |
| هم الخلايا المضيفة القادرة على التعبير عن الحمض النووي المؤتلف. | يجب أن يكونوا قادرين على التكرار الذاتي داخل الكائن الحي المضيف. |
| اختيار | |
| الخلايا التي يمكن زراعتها بسهولة ومضاعفة يتم تحديدها كخلايا مضيفة. | يجب أن تكون سهلة الاستخراج ويجب أن تحتوي على علامات قابلة للتحديد. |
ملخص - المتحولات مقابل المؤتلف
المتحولات هي الخلايا أو الكائنات التي تحتوي على جزيئات DNA المؤتلفة بداخلها. المؤتلفات هي الكائنات الحية أو الخلايا التي خضعت لإعادة التركيب الجيني ولديها DNA غريب داخل جينوماتها. غالبًا ما تستخدم الخلايا البكتيرية كخلايا مضيفة للتحول وغالبًا ما تستخدم البلازميدات والعاثيات كناقلات في تقنية الحمض النووي المؤتلف. هذا هو الفرق بين المحولات و المؤتلف.
