الفرق الرئيسي - استخراج الحمض النووي مقابل الحمض النووي الريبي
تعتبر دراسة DNA و RNA جوانب حيوية لفهم المفاهيم الأساسية للبيولوجيا الجزيئية والتكنولوجيا الحيوية وعلم الوراثة. من الضروري استخراج عينات من الحمض النووي الريبي النقي والحمض النووي الريبي من أجل تنفيذ الإجراءات التجريبية أثناء هذه الدراسات. يتمثل الاختلاف الرئيسي بين استخراج الحمض النووي والحمض النووي الريبي في أن عملية استخراج الحمض النووي تنقي الحمض النووي بينما ينقي استخراج الحمض النووي الريبي الحمض النووي الريبي. تتكون عملية استخلاص الحمض النووي من ثلاث خطوات مختلفة: تحلل الخلايا وتقويض دهون الغشاء والبروتينات ، وتكتل الهدم بواسطة محلول ملحي مركز ، وترسيب الحمض النووي بالإيثانول.قد يتكون الإجراء المكون من ثلاث خطوات من خطوتين اختياريتين. تتكون عملية تنقية الحمض النووي الريبي من أربع خطوات مختلفة: إضافة ثيوسيانات الغوانيديوم لتحلل الخلية ، وتمسخ البروتين بما في ذلك الريبونوكلياز ، وفصل الحمض النووي الريبي عن طريق إضافة الكلوروفورم والفينول وغسل الراسب باستخدام الإيثانول.
ما هو استخراج الحمض النووي؟
استخراج الحمض النووي هو عملية فيزيائية وكيميائية تستخدم لتنقية الحمض النووي من عينة. يعتبر استخراج الحمض النووي جانبًا مهمًا في سياق البيولوجيا الجزيئية وعلوم الطب الشرعي. تتكون العملية من ثلاث خطوات أساسية. في البداية ، يجب الحصول على الخلايا ذات الأهمية. بعد ذلك ، يتم تسهيل تحلل الخلية من أجل كسر غشاء الخلية ، الذي يفتح الخلية ويكشف السيتوبلازم مع الحمض النووي. يمكن استخدام المواد الخافضة للتوتر السطحي أو المنظفات الأخرى لتحليل الدهون من غشاء الخلية بينما يتم تقويض البروتينات الموجودة بواسطة البروتياز. هذه الخطوة إختيارية. بمجرد أن يتم تحلل الخلية ، يتم تسهيل تكتل الجزيئات المهدمة بواسطة محاليل الملح المركزة.يتبع ذلك الطرد المركزي للمحلول الذي يفصل كتل الحطام عن الحمض النووي. في هذه المرحلة ، يتم خلط الحمض النووي المتمايز مع الكواشف والأملاح المستخدمة أثناء دورة الخلية.
الشكل 01: استخراج الحمض النووي
لتنقيتها أكثر ، يمكن اتباع الخطوات التالية. إحدى الطرق هي ترسيب الإيثانول ، والتي تتضمن خلط الإيثانول المثلج مع عينة الحمض النووي المنفصلة. الحمض النووي غير قابل للذوبان في الكحول وبالتالي ينتج بيليه بسبب تراكم جزيئات الحمض النووي معًا. يتم إضافة أسيتات الصوديوم في هذه العملية من أجل تعزيز درجة الترسيب عن طريق زيادة القوة الأيونية. بالإضافة إلى عملية ترسيب الإيثانول ، يمكن أيضًا تحفيز عملية استخراج الفينول الكلوروفورم لهذا الغرض. في هذه الطريقة ، يفسد الفينول البروتينات الموجودة في العينة.بمجرد الطرد المركزي ، ستبقى البروتينات المحوَّلة في الطور العضوي بينما تكون جزيئات الحمض النووي الممزوجة بالكلوروفورم موجودة في المرحلة المائية. سيزيل الكلوروفورم بقايا الفينول. بمجرد اكتمال الاستخراج ، يتم الاحتفاظ بالحمض النووي مذابًا في محلول TE أو ماء شديد النقاء.
ما هو استخراج الحمض النووي الريبي؟
تنقية الحمض النووي الريبي هي عملية يتم من خلالها تنقية الحمض النووي الريبي من عينة بيولوجية. نظرًا لوجود نوكلياز الريبونيز في الخلايا والأنسجة ، فإن هذه العملية معقدة. يمتلك إنزيم الريبونوكلياز القدرة على تحلل الحمض النووي الريبي بسرعة. الطبيعة الكيميائية للريبونوكليازات مستقرة للغاية ، ومن الصعب تعطيلها. يعد تحييد الريبونوكلياز أحد الخيارات. نظرًا لأن هذا الإنزيم موجود في كل مكان في الخلايا والأنسجة ، فقد تم تطوير تقنيات خاصة لاستخراج الحمض النووي الريبي. من بين العديد من الطرق ، الطريقة الشائعة هي استخراج Guanidinium thiocynate-phenol-chloroform.
الشكل 02: استخراج الحمض النووي الريبي
تعتمد طريقة استخراج Guanidinium thiocynate-phenol-chloroform على الطرد المركزي وفصل الطور. يتكون الخليط المراد طرده من عينة مائية ومحلول مشبع بالماء يتكون من الفينول والكلوروفورم. بمجرد الطرد المركزي ، يتكون المحلول من طور مائي علوي ومرحلة عضوية سفلية تحت ظروف درجة الحموضة المحايدة (الرقم الهيدروجيني 7-8). RNA موجود في المرحلة المائية. تتكون المرحلة العضوية عادة من بروتينات مذابة في الفينول ودهون مذابة في الكلوروفورم. يضاف عامل تشوتروبيك (جزيء لديه القدرة على كسر الروابط الهيدروجينية بين جزيئات الماء) ؛ هذا هو المعروف باسم ، غوانيدينيوم ثيوسيانات. هذا العامل لديه القدرة على تغيير طبيعة البروتينات التي تشمل الريبونوكليازات التي يمكن أن تتحلل من الحمض النووي الريبي وتشارك في تحلل الخلايا. كما أنه يفصل الرنا الريباسي عن البروتينات الريبوزومية.الخطوة الأخيرة لتنقية الحمض النووي الريبي هي غسل ترسيب المرحلة المائية بالإيثانول. يمكن أيضًا تنقية الحمض النووي الريبي باستخدام النيتروجين السائل.
ما هي أوجه التشابه بين استخراج الحمض النووي والحمض النووي الريبي؟
- كلتا عمليتي الاستخراج تستخدم مواد كيميائية ضارة مثل الفينول والكلوروفورم.
- الطرد المركزي تقنية أساسية لكلتا العمليتين.
- يستخدم الإيثانول لغسل الراسب والحصول على الحمض النووي المنقى أو الحمض النووي الريبي.
ما هو الفرق بين استخراج الحمض النووي والحمض النووي الريبي؟
استخراج الحمض النووي مقابل الحمض النووي الريبي |
|
| استخراج الحمض النووي هو عملية استخراج الحمض النووي من كائن حي أو عينة. | استخراج الحمض النووي الريبي هو عملية استخراج الحمض النووي الريبي من عينة. |
| خطوات | |
| تتكون عملية استخراج الحمض النووي من ثلاث خطوات مختلفة بخطوتين اختياريتين. | تتكون عملية استخراج الحمض النووي الريبي من أربع خطوات مختلفة. |
| الكواشف | |
| السطحي ، البروتياز (اختياري) ، الكحول ، الكلوروفورم ، الفينول ، أسيتات الصوديوم تستخدم لاستخراج الحمض النووي. | غوانيديوم ثيوسيانات ، كلوروفورم ، فينول ، إيثانول تستخدم لاستخراج الحمض النووي الريبي. |
ملخص - استخراج الحمض النووي مقابل الحمض النووي الريبي
استخراج الحمض النووي والحمض النووي الريبي هي جوانب حيوية للإجراءات التجريبية لدراسة البيولوجيا الجزيئية وعلم الوراثة والتكنولوجيا الحيوية. تشتمل كلتا العمليتين على كواشف متشابهة ، لكن استخراج الحمض النووي الريبي يستخدم كاشفًا خاصًا يُعرف باسم ثيوسيانات الغوانيديوم الذي يقلل من نشاط الريبونوكلياز.هذا هو الفرق الرئيسي بين استخراج DNA و RNA.
تنزيل نسخة PDF من DNA مقابل استخراج الحمض النووي الريبي
يمكنك تنزيل نسخة PDF من هذه المقالة واستخدامها للأغراض غير المتصلة بالإنترنت وفقًا لملاحظة الاقتباس. يرجى تنزيل نسخة PDF هنا الفرق بين استخراج الحمض النووي والحمض النووي الريبي
