الفرق بين طبقة رقيقة من الورق وكروماتوغرافيا العمود

2024 مؤلف: Alex Aldridge | [email protected]. آخر تعديل: 2023-12-17 13:32

الفرق الرئيسي - الورقة مقابل الطبقة الرقيقة مقابل العمود اللوني

كروماتوغرافيا الورق ، كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة ، وكروماتوغرافيا العمود هي ثلاثة أنواع من تقنيات الكروماتوغرافيا. يعتمد الاختلاف الرئيسي بين كروماتوغرافيا الورق وكروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة وكروماتوغرافيا العمود على نوع الطور الثابت المستخدم في تقنية الكروماتوغرافيا. يستخدم كروماتوغرافيا الورق ورق السليلوز كمرحلة ثابتة ، ويستخدم كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة الألومينا أو هلام السيليكا كمرحلة ثابتة ، بينما يستخدم كروماتوغرافيا العمود عمودًا معبأ بمادة مصفوفة مناسبة كمرحلة ثابتة.

في عملية فصل وتحديد الجزيئات الحيوية مثل البروتينات والكربوهيدرات ، يعتبر اللوني تقنية فيزيائية حيوية مهمة مستخدمة. يفصل الكروماتوغرافيا المركبات بناءً على قابليتها للذوبان والحجم والشحن. بناءً على آلية الفصل ، يستخدم اللوني آليات مثل التبادل الأيوني والامتصاص والتقسيم واستبعاد الحجم وهناك ثلاث تقنيات كروماتوغرافية ؛ وهي: الورق ، والطبقة الرقيقة ، وكروماتوغرافيا العمود. يعتمد كروماتوغرافيا الورق على الامتزاز الصلبة والسائلة للذوبان للمركب ، ويستخدم ورق السليلوز كمرحلة ثابتة. يعتمد كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة على امتزاز الجزيئات الصلبة والسائلة. لها طور ثابت يتكون عادة من الألومينا أو هلام السيليكا والطور المتحرك هو المذيب. يستخدم كروماتوغرافيا العمود عمودًا معبأ بمصفوفة تُستخدم لفصل الجزيئات بشكل أساسي بناءً على حجمها أو تقاربها أو شحنتها.

ما هو كروماتوغرافيا الورق؟

الكروماتوغرافيا الورقية هي أبسط أنواع الكروماتوغرافيا المستخدمة ، ولا تستخدم في البحث المكثف. يتم استخدامه بشكل أساسي في مختبرات الطلاب لتحديد الجزيئات الحيوية مثل الأحماض الأمينية والكربوهيدرات الموجودة في الخلائط. يستخدم كروماتوغرافيا الورق مرحلة ثابتة يتم إجراؤها باستخدام ورق السليلوز أو ورق ترشيح Whatman وطور متحرك يتم تحضيره عادةً باستخدام مذيبات عضوية مثل n- بيوتانول ، إلخ. المرحلة الثابتة مشبعة بالماء ، مما يجعل المرحلة الثابتة سائلة. وهكذا ، عندما يتم رصد المركبات والسماح لها بالعمل في وجود الطور المتحرك ، اعتمادًا على قابلية ذوبان المركبات ، يتم فصلها. وبالتالي ، عند تطوير مخطط الكروماتوجرام ، يمكن عمل تلطيخ لتحديد طول تشغيل كل مركب. وبالتالي يمكن حساب عامل الاستبقاء.

الشكل 01: كروماتوغرافيا الورق

يمكن تصنيف كروماتوغرافيا الورق على أنها كروماتوغرافيا تصاعدية للورق وكروماتوغرافيا ورقية تنازلية اعتمادًا على اتجاه المذيب الجاري تشغيله.

ما هو كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة؟

كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة أو TLC هي تقنية شائعة الاستخدام لتحديد الأحماض الأمينية المختلفة الموجودة في خليط أو لتحديد البروتينات. تعتمد تقنية الفصل على امتصاص السائل الصلب. أثناء الفصل اللوني للطبقة الرقيقة ، يتم استخدام صفيحة مصنوعة من الألومينا أو هلام السيليكا كمرحلة ثابتة. يختلف خليط المذيب حسب المتطلبات وقد يستخدم تركيبات مختلفة من المركبات العضوية مثل n- بيوتانول وحمض الخليك والماء لتحضير المذيب. يتم رصد المركبات المراد فصلها على اللوح وغمرها في خليط المذيب. بمجرد انتقال المذيب لأعلى بناءً على العمل الشعري الذي تقدمه اللوحة ، فإن المركبات التي تم رصدها على اللوحة تتحرك أيضًا اعتمادًا على قابليتها للذوبان في المذيب.

الشكل 02: كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة

يتم الكشف عن البقع بعد تشغيل الكروماتوجرام من خلال إجراءات تلطيخ مختلفة. يستخدم البعض تلطيخ النينهيدرين وهو طريقة سامة للتلطيخ. تستخدم المخططات الاستشرابية الحديثة للطبقة الرقيقة تقنيات التألق لعرض الكروماتوجرام بعد التشغيل. اعتمادًا على المسافات التي قطعها ، يمكن حساب وقت الاحتفاظ لكل مركب. يمكن استخدام هذا لتحديد نوع المركب المفصول بناءً على الخليط المستخدم. يستخدم TLC بشكل أساسي لتحديد الأحماض الأمينية في خليط البروتين وأيضًا لفصل أنواع مختلفة من السكريات الأحادية الموجودة في الخليط.

ما هو العمود اللوني؟

العمود اللوني هو مصطلح واسع يستخدم لوصف أنواع عديدة من تقنيات الكروماتوغرافيا التي تستخدم طريقة الفصل القائمة على العمود.في كروماتوغرافيا العمود ، يتم استخدام عمود مادي مع مادة حشو لفصل المركبات. قد يعتمد الفصل على الخصائص الفيزيائية المختلفة التي تظهرها المركبات. يمكن أن تكون هذه الخصائص هي الشحنة والحجم والتشكيل ثلاثي الأبعاد وسعة الربط ، وما إلى ذلك ، وبالتالي ، يعمل العمود المعبأ بمادة المصفوفة كمرحلة ثابتة ويعمل المخزن المؤقت للغسيل المطبق على العمود كطور متحرك.

إذا تم فصل الجزيئات بناءً على الحجم ، فإن مادة التعبئة يتم تعبئتها بطريقة تترك مسامًا للمركبات لتنتقل خلالها. وبالتالي ، فإن الجزيئات الأكبر التي لا يمكن أن تتدفق عبر المسام يتم التخلص منها أولاً ، بينما تستغرق الجزيئات الأصغر وقتًا أطول للتخلص منها.

الشكل 03: العمود اللوني

إذا تم فصل الجزيئات بناءً على شحنتها ، فستحتوي المرحلة الثابتة إما على أنيون أو مبادل كاتيوني تنجذب إليه المركبات بناءً على شحنتها. وبالتالي ، أثناء خطوة الغسيل ، سيتم التخلص من المركبات غير المقيدة. عند إضافة المخزن المؤقت للشطف ، سيتم التخلص من المركبات المشحونة المرتبطة. يعتمد اكتشاف هذه العناصر في الغالب على تقنيات القياس الطيفي.

ما هي أوجه التشابه بين طبقة رقيقة من الورق وكروماتوغرافيا العمود؟

• كل الورق ذو الطبقة الرقيقة والكروماتوجرافيا العمودية ، تستخدم ثلاث تقنيات لفصل الجزيئات الحيوية مثل الأحماض الأمينية والبروتينات والكربوهيدرات.
• لطبقة الورق الرقيقة وتقنيات كروماتوغرافيا العمود طور متحرك ومرحلة ثابتة.
• تستخدم تقنيات كروماتوغرافيا العمود والطبقة الرقيقة للورق آليات فيزيائية حيوية للفصل.

ما هو الفرق بين طبقة رقيقة من الورق وكروماتوغرافيا العمود؟

الورق مقابل الطبقة الرقيقة مقابل العمود اللوني
كروماتوغرافيا الورق	كروماتوغرافيا الورق هي تقنية كروماتوغرافية تستخدم لفصل المركبات على أساس الامتزاز السائل والسائل وقابلية الذوبان للمركب. يستخدم ورق السليلوز كمرحلة ثابتة.
كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة	كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة هي تقنية كروماتوغرافية أخرى تعتمد على امتصاص الجزيئات الصلبة والسائلة. له طور ثابت مصنوع من الألومينا أو هلام السيليكا ومذيب مثل الطور المتحرك وهو المذيب.
العمود اللوني	العمود اللوني يستخدم عمودًا معبأ بمصفوفة تُستخدم لفصل الجزيئات بشكل أساسي بناءً على حجمها أو تقاربها أو شحنتها.
المرحلة الثابتة
كروماتوغرافيا الورق	الورق المصنوع من النيتروسليلوز من Whatman يستخدم كمرحلة ثابتة في الكروماتوغرافيا الورقية.
كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة	الألومينا أو هلام السيليكا يستخدم كمرحلة ثابتة من كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة.
العمود اللوني	يتم استخدام عمود معبأ بمواد تعبئة مناسبة كمرحلة ثابتة في كروماتوغرافيا العمود.
Mobile Phase
كروماتوغرافيا الورق	تشغيل المذيب هو المرحلة المتنقلة للكروماتوغرافيا الورقية.
كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة	تشغيل المذيب هو المرحلة المتنقلة من كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة.
العمود اللوني	غسل المخزن المؤقت هو المرحلة المتنقلة من العمود اللوني.
الآليات المستخدمة للفصل
كروماتوغرافيا الورق	يعتمد كروماتوغرافيا الورق على امتصاص السائل الصلب.
كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة	يعتمد كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة على امتصاص السائل الصلب.
العمود اللوني	يعتمد كروماتوغرافيا العمود على استبعاد الحجم والشحنة والشكل.
شطف العازلة
كروماتوغرافيا الورق	غير مطلوب بواسطة كروماتوغرافيا الورق.
كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة	غير مطلوب لكروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة.
العمود اللوني	مطلوب في العمود اللوني.
كشف
كروماتوغرافيا الورق	تلطيخ وتحديد عامل الاستبقاء.
كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة	تلطيخ وتحديد عامل الاستبقاء.
العمود اللوني	تحديد الطيف الضوئي.

ملخص - طبقة رقيقة من الورق مقابل العمود اللوني

كروماتوغرافيا الورق و TLC وكروماتوجرافيا العمود هي تقنيات فصل مستخدمة لفصل الجزيئات الحيوية مثل البروتينات والأحماض الأمينية والكربوهيدرات (السكريات الأحادية بشكل أساسي).يستخدم كروماتوغرافيا الورق ورق السليلوز كمرحلة ثابتة ، وتعتمد آلية الفصل على الامتزاز الصلب والسائل. يستخدم TLC أيضًا آليات الامتزاز الصلبة والسائلة. يتم فصل الجزيئات على الطور الثابت ، اعتمادًا على قابليتها للذوبان في الطور المتحرك. يستخدم كروماتوغرافيا العمود الخصائص الفيزيائية مثل الحجم والشكل والشحنة والوزن الجزيئي للمركب للفصل. يعمل العمود المعبأ بمادة المصفوفة كمرحلة ثابتة ، بينما يعمل المخزن المؤقت للغسيل كمرحلة مذيب. هذا هو الفرق بين طبقة رقيقة من الورق وكروماتوغرافيا العمود.