الاختلاف الرئيسي بين اختبار برادفورد وبروتين لوري هو أن مقايسة بروتين برادفورد تعتمد على تحول الامتصاص لصبغة كوماسي الزرقاء الرائعة G-250 بينما يعتمد فحص بروتين لوري على تفاعل أيونات النحاس (Cu +) أيونات التي تنتجها أكسدة روابط الببتيد مع كاشف Folin – Cioc alteu.
المقايسة هي تقنية تحليلية تساعد على توصيف المكونات الوظيفية الرئيسية للعينة. ومن ثم ، يمكن أن يكون الاختبار إما اختبارًا نوعيًا أو كميًا. تستخدم العديد من المجالات بما في ذلك الطب المخبري وعلم العقاقير والبيولوجيا البيئية والبيولوجيا الجزيئية والكيمياء الحيوية وعلم المناعة هذا النوع من المقايسات بشكل روتيني.اختبار بروتين برادفورد ولوري هما اختباران بيوكيميائيان يحددان تركيز البروتين في محلول العينة. يستخدم كلا الاختبارين تقنيات قياس الألوان لتقديم النتائج.
ما هو برادفورد فحص البروتين؟
اختبار بروتين برادفورد هو إجراء تحليلي طيفي سريع لتحليل البروتين. يظهر دقة عالية عند قياس تركيز البروتين في المحلول. قدمت ماريون برادفورد هذا الإجراء في عام 1976. في هذا الاختبار ، يعتمد التفاعل الكلي على تكوين الأحماض الأمينية للبروتينات التي تم قياسها. بعبارة أخرى ، اختبار برادفورد للبروتين هو فحص لوني. ويستخدم صبغة كوماسي الزرقاء اللامعة. ومن ثم ، فإن مقايسة البروتين اللونية تعتمد على تحول امتصاص الصبغة. يوجد Coomassie الأزرق اللامع G-250 في ثلاثة أشكال: كاتيوني (أحمر) ، أنيوني (أزرق) ومحايدة (أخضر). خلال الظروف الحمضية ، يتحول اللون الأحمر للصبغة إلى اللون الأزرق. يؤكد ارتباط البروتين. إذا لم يكن البروتين موجودًا ، فقد يظل المحلول باللون البني.
الشكل 01: اختبار بروتين برادفورد
يختلف اختبار بروتين برادفورد عن فحوصات البروتين الأخرى لأنه أقل عرضة لتداخلات المركبات الكيميائية المختلفة الموجودة في محلول البروتين. وتشمل هذه المركبات الصوديوم والبوتاسيوم والجلوكوز والسكروز وغيرها.
ما هو Lowry Protein Assay؟
فحص بروتين Lowry هو اختبار كيميائي حيوي يستخدم لتحديد المستوى الكلي للبروتين في محلول. لوري هو الشخص الذي طور هذا الكاشف في عام 1940. يصور الإجراء تركيز البروتين الكلي للمحلول عن طريق تغيير اللون الذي يتناسب مع تركيز البروتين في المحلول. وبالتالي ، يعد هذا أيضًا اختبار قياس لوني للبروتين.
التفاعل بين أيونات النحاس (Cu +) الناتجة عن أكسدة روابط الببتيد وكاشف Folin-Cioc alteu هو أساس هذا الإجراء.يحتوي هذا الكاشف أيضًا على حمض الفوسفوموليبديك وحمض الفوسفور التنجستيك. ومع ذلك ، فإن آلية التفاعل لفحص بروتين Lowry ليست مفهومة جيدًا. لكنها تنطوي على أكسدة بقايا السيستين والتربتوفان والتيروزين عن طريق تقليل كاشف فولين سيوكالتو.
الشكل 02: فحص بروتين لوري
تساهم بقايا السيستين في الامتصاص الذي لوحظ في فحص بروتين Lowry وينتج عن التفاعل جزيء أزرق لامع ؛ الموليبدينوم الأزرق غير المتجانسة. يتم قياس اختزال هذا الجزيء عن طريق الامتصاص عند 660 نانومتر. ومن ثم ، فإن تركيز بقايا السيستين والتربتوفان التي قللت من كاشف فولين سيوكالتيو يستنتج التركيز الكلي للبروتين في المحلول.
ما هي أوجه التشابه بين برادفورد و Lowry Protein Assay؟
- فحوصات بروتين برادفورد ولوري تحدد تركيز البروتين في المحلول.
- كلتا الطريقتين هي طرق قياس الألوان.
- أيضا حساسية الطريقتين عالية
ما هو الفرق بين برادفورد ولوري بروتين الفحص؟
اختبار بروتين برادفورد ولوري نوعان من المقايسات التي تحدد تركيز البروتين في المحلول. يعتمد اختبار برادفورد للبروتين على تحول الامتصاص لصبغة Coomassie الزرقاء الرائعة G-250 بينما يعتمد فحص بروتين Lowry على تفاعل أيونات النحاس الناتجة عن أكسدة روابط الببتيد ، مع كاشف Folin-Cioc alteu. لذلك ، هذا هو الفرق الرئيسي بين برادفورد ولوري بروتين مقايسة. يستغرق فحص بروتين برادفورد 15 دقيقة للحصول على نتيجة بينما يستغرق فحص بروتين Lowery 40-60 دقيقة للحصول على نتيجة. وبالتالي ، يعد هذا فرقًا آخر بين اختبار بروتين برادفورد ولوري. علاوة على ذلك ، يعتمد اختبار بروتين برادفورد على تكوين الأحماض الأمينية بينما يعتمد فحص بروتين Lowry جزئيًا على تكوين الأحماض الأمينية.ومن ثم ، يعد هذا أيضًا فرقًا بين اختبار بروتين برادفورد ولوري.
أدناه معلوماتية توفر مزيدًا من التفاصيل حول الفرق بين اختبار بروتين برادفورد ولوري.
ملخص - برادفورد مقابل لوري فحص البروتين
المقايسة هي تقنية تحليلية تستخدم لوصف المكون الوظيفي الرئيسي للعينة. مقايسة بروتين برادفورد ولوري نوعان من فحوصات البروتين التي تعمل في ظل تقنيات قياس الألوان. تحدد كل من فحوصات بروتين برادفورد ولوري تركيز البروتين في المحلول. ومع ذلك ، فإن الاختلاف الرئيسي بين Bradford و Lowry Protein Assay يكمن في تقنية القياس اللوني التي يستخدمونها. يستخدم اختبار بروتين برادفورد Coomassie الأزرق اللامع G-250 بينما يستخدم فحص بروتين Lowry أيونات النحاس (Cu +) وكاشف Folin – Cioc alteu.علاوة على ذلك ، تعطي طريقة برادفورد نتائج سريعة مقارنة بمقايسة بروتين لوري. ومع ذلك ، فإن كلتا الطريقتين هما طريقتان حساستان للغاية وتخضعان لتدخلات من مواد مختلفة.
