الفرق الرئيسي - غرام وصمة عار مقابل الثقافة
صبغة جرام هي تقنية تلطيخ يتم إجراؤها لتمييز البكتيريا إلى مجموعتين وفقًا لسمك طبقة الببتيدوغليكان في جدار الخلية. الثقافة هي طريقة لزراعة الكائنات الحية الدقيقة والحفاظ عليها في ظروف معملية لتحليل مختلف. الفرق الرئيسي بين غرام وصمة عار والثقافة هو وظيفتها ؛ سلالة غرام هي تقنية تلطيخ للبكتيريا حيث الثقافة هي طريقة لزراعة الكائنات الحية الدقيقة والحفاظ عليها.
ما هي صبغة غرام؟
صبغة غرام هي تقنية تلطيخ تفاضلي مهمة تستخدم لتحديد البكتيريا في علم الأحياء الدقيقة.تم تقديم هذه التقنية من قبل عالم البكتيريا الدنماركي هانز كريستيان جرام في عام 1884. يصنف صبغ غرام البكتيريا إلى مجموعتين رئيسيتين: إيجابية الجرام وسلبية الجرام. هذه مهمة جدا في تصنيف وتحديد البكتيريا. يتم إجراء تلوين غرام كخطوة أولية للتوصيف البكتيري.
يتم تجميع البكتيريا بناءً على الاختلافات في جدار الخلية. تحتوي البكتيريا موجبة الجرام على طبقة ببتيدوغليكان سميكة في جدارها الخلوي بينما تحتوي البكتيريا سالبة الجرام على طبقة ببتيدوغليكان رقيقة في جدارها الخلوي كما هو موضح في الشكل 01. وستستند نتيجة تلطيخ الجرام إلى اختلاف السماكة في طبقة الببتيدوغليكان في جدار الخلية.
الشكل 1: البكتيريا موجبة الجرام والبكتيريا سالبة الجرام
يتم إجراء تلطيخ الجرام باستخدام أربعة كواشف مختلفة وهي ؛ وصمة عار أساسية ، لاذعة ، عامل إزالة اللون ، وصمة عار مضادة. يعمل الكريستال البنفسجي والصفرانين كبقع أولية ومضادة ، على التوالي ، في حين أن جرام اليود و 95٪ كحول يعملان كالبقع اللاذعة ومزيل اللون ، على التوالي.
الخطوات الأساسية للغرام وصمة عار
- يتم تحضير مسحة بكتيرية على شريحة زجاجية نظيفة ، حرارة ثابتة ومبردة.
- مسحة تغمرها البنفسج الكريستالي لمدة 1-2 دقيقة.
- تشطف المسحة بمياه الصنبور البطيئة الجارية لإزالة البقع الزائدة.
- يوضع غرامات اليود على اللطاخة لمدة دقيقة.
- تشطف المسحة بمياه الصنبور البطيئة الجارية
- يتم غسل المسحة بنسبة 95٪ كحول لمدة 2-5 ثوانٍ وتشطف بماء الصنبور البطيء الجاري.
- تلطخ المسحة بالسافران لمدة دقيقة واحدة
- تشطف اللطاخة بمياه الصنبور البطيئة الجارية ، وتجفف وتُلاحظ تحت المجهر.
في نهاية صبغة الجرام ، ستلاحظ البكتيريا سالبة الجرام باللون الوردي بينما ستلاحظ البكتيريا الموجبة للجرام باللون الأرجواني كما هو موضح في الشكل 02. يتم تحديد نتيجة صبغة الجرام حسب السُمك من طبقة الببتيدوغليكان في جدارها الخلوي. أثناء خطوة إزالة اللون ، تتم إزالة البقعة الأولية والرائحة بسهولة من البكتيريا سالبة الجرام وتصبح عديمة اللون نظرًا لوجود طبقة رقيقة من الببتيدوغليكان. يتم الاحتفاظ بالبقع الأولية في البكتيريا الموجبة للجرام لأنها تحتوي على طبقة سميكة من الببتيدوغليكان. لن تكون البقع المضادة فعالة بالنسبة للبكتيريا الموجبة للجرام بسبب الاحتفاظ بالبقعة الأولية. لذلك ستظهر البكتيريا الموجبة للجرام في لون البقعة الأساسي ، أي اللون الأرجواني. سوف تلطخ البقع المضادة للبكتيريا سالبة الجرام وستكون مرئية في اختيار اللون وهو لون السافرانين. وبالتالي ، من السهل تصنيف البكتيريا إلى مجموعتين من خلال صبغة الجرام وهي ذات قيمة في التمايز البكتيري والتعرف عليه.
الشكل 2: سلالة الجرام
ما هي الثقافة؟
الثقافة الميكروبية هي طريقة لتربية الكائنات الحية الدقيقة والحفاظ عليها في ظل ظروف معملية لأغراض مختلفة. تزرع الثقافات في أوساط صلبة وشبه صلبة وسائلة بناءً على نوع والغرض من زراعة الكائنات الحية الدقيقة. يتم تزويد الثقافات بالمغذيات اللازمة وظروف النمو التي تتطلبها الكائنات الحية الدقيقة. هناك مكونات مختلفة لوسط الاستزراع مثل مصدر الطاقة ، ومصدر الكربون ، ومصدر النيتروجين ، والمعادن ، والمغذيات الدقيقة ، والماء ، وعامل التصلب ، وما إلى ذلك. يجب ضبط درجة الحرارة المثلى والأكسجين ودرجة الحموضة وفقًا لنوع الكائن الدقيق المزروع.
هناك أنواع مختلفة من الثقافات الميكروبية ؛ على سبيل المثال ، ثقافة الدُفعة ، الثقافة المستمرة ، ثقافة الطعنة ، ثقافة لوحة أجار ، ثقافة المرق ، إلخ.وفقًا لتكوين الوسط المتنامي ، هناك أنواع مختلفة من وسائط الاستزراع المعروفة باسم الوسائط التركيبية والوسائط شبه الاصطناعية والوسائط الطبيعية. يتم تحضير المزارع الميكروبية تحت ظروف معقمة داخل حجرة خاصة تسمى تدفق الهواء الرقائقي. يتم تعقيم وسط النمو والأواني الزجاجية قبل تلقيح الكائنات الحية الدقيقة المرغوبة. في ظل ظروف معقمة مناسبة ، يتم نقل الكائنات الحية الدقيقة المستهدفة إلى وسط المغذيات المعقم وتحضينها عند درجة الحرارة المثلى. داخل الوسط ، سوف تنمو الكائنات الحية الدقيقة وتتكاثر باستخدام العناصر الغذائية المتوفرة.
الشكل 3: ثقافة بكتيرية على اللوحة
ما الفرق بين صبغة غرام والثقافة؟
صبغة غرام مقابل الثقافة |
|
| سلالة الجرام هي تقنية تلطيخ تفاضلي تستخدم للتمايز البكتيري والتعرف عليه. | الثقافة الميكروبية هي طريقة لتنمية الكائنات الحية الدقيقة في المختبر. |
| المكونات | |
| هذا يستخدم كواشف مختلفة بما في ذلك بقعتين. | هذا يستخدم وسائط استنبات مختلفة مثل الوسائط الصلبة وشبه الصلبة والسائلة المكونة من العناصر الغذائية والظروف الضرورية الأخرى. |
| الوظائف الأساسية | |
| يسمح هذا بتجميع البكتيريا في مجموعتين: جرامات سالبة و جرام موجبة. | هذا يسمح بتكاثر الكائنات الحية الدقيقة لأغراض مختلفة. |
| قاعدة | |
| تعتمد نتيجة صبغة غرام على الاختلافات في طبقة الببتيدوغليكان لجدار الخلية. | ستنمو الكائنات الحية الدقيقة وتتكاثر داخل وسط الثقافة. |
| النتيجة | |
| البكتيريا سالبة الجرام مرئية باللون الوردي وتظهر البكتيريا الموجبة للجرام باللون الأرجواني. | على الأطباق ، يمكن رؤية مستعمرات الكائنات الحية الدقيقة. على الوسائط السائلة ، الكائنات الحية الدقيقة في شكل معلق. |
ملخص - غرام وصمة عار مقابل الثقافة
يتم تحضير المزارع الميكروبية وصيانتها في ظروف معملية لأغراض مختلفة مثل التخزين والاختبار والتنقية الكيميائية وما إلى ذلك. صبغة الجرام هي إجراء تلطيخ يميز البكتيريا إلى مجموعتين رئيسيتين تسمى البكتيريا سالبة الجرام والبكتيريا الموجبة للجرام.لذلك ، فإن الاختلاف بين صبغة الجرام والمستنبت هو أن صبغة الجرام هي تقنية تلطيخ للبكتيريا بينما الثقافة هي طريقة لزراعة الكائنات الحية الدقيقة والحفاظ عليها في المختبرات.
