الفرق الرئيسي - صبغة جرام مقابل حمض سريع
البكتيريا هي كائنات دقيقة صغيرة جدًا. فهي شفافة ، ويصعب اكتشافها في ظل ظروف معيشية غير ملوثة. وبالتالي ، تم تطوير طرق تلطيخ مختلفة لتسهيل الكشف عن البكتيريا. هناك ثلاثة أنواع رئيسية من تقنيات التلوين: التلوين البسيط ، والتلوين التفاضلي ، والتلوين الهيكلي. التلوين التفاضلي هو تقنية تستخدم أكثر من صبغة واحدة لتمييز البكتيريا. تُعرف بقع الجرام والبقع الصامدة للأحماض باسم البقع التفاضلية. تلطيخ الجرام هو تقنية تلطيخ تفاضلي ، والتي تقسم البكتيريا إلى مجموعتين تعرفان باسم البكتيريا موجبة الجرام والبكتيريا سالبة الجرام.البقعة المقاومة للأحماض هي بقعة تفاضلية تُستخدم لتحديد الكائنات الحية المقاومة للأحماض مثل المتفطرة من الكائنات الحية السريعة غير الحمضية. هذا هو الفرق الرئيسي بين صبغة جرام وصمة عار الحمضية.
ما هي صبغة غرام؟
صبغة غرام هي تقنية تلطيخ تفاضلي مهمة تستخدم لتحديد البكتيريا في علم الأحياء الدقيقة. تم تقديم هذه التقنية من قبل عالم البكتيريا الدنماركي هانز كريستيان غرام في عام 1884. يصنف صبغ غرام البكتيريا إلى مجموعتين رئيسيتين اسمهما موجب وسالب الجرام ، وهما مهمان للغاية في تصنيف البكتيريا وتعريفها. يقوم علماء الأحياء الدقيقة بإجراء تلطيخ الجرام كخطوة أولية في توصيف البكتيريا أثناء دراستهم.
يتم تجميع البكتيريا بناءً على الاختلافات في جدار الخلية. تتكون البكتيريا موجبة الجرام من طبقة ببتيدوغليكان سميكة في جدارها الخلوي بينما تتكون البكتيريا سالبة الجرام من طبقة ببتيدوغليكان رقيقة في جدارها الخلوي. ستعتمد نتيجة تلطيخ الجرام على الاختلاف في سمك طبقة الببتيدوغليكان لجدار الخلية.
يتم إجراء تلطيخ الجرام باستخدام أربعة كواشف مختلفة وهي ؛ وصمة عار أساسية ، لاذعة ، عامل إزالة اللون ، وصمة عار مضادة. يتم استخدام الكريستال البنفسجي والصفرانين كبقع أولية ومضادة ، على التوالي ، في حين يتم استخدام غرام اليود و 95٪ كحول كالبقع اللاذعة ومزيل اللون ، على التوالي. الخطوات الأساسية لصبغ الجرام هي كما يلي ؛
- يتم تحضير مسحة بكتيرية على شريحة زجاجية نظيفة ، حرارة ثابتة ومبردة.
- مسحة تغمرها البنفسج الكريستالي لمدة 1-2 دقيقة.
- تشطف المسحة بمياه الصنبور البطيئة الجارية لإزالة البقع الزائدة.
- يوضع غرامات اليود على اللطاخة لمدة دقيقة.
- تشطف المسحة بمياه الصنبور البطيئة الجارية
- يتم غسل المسحة بنسبة 95٪ كحول لمدة 2-5 ثوانٍ وتشطف بماء الصنبور البطيء الجاري.
- تلطخ المسحة بالسافران لمدة دقيقة واحدة
- تشطف اللطاخة بمياه الصنبور البطيئة الجارية ، وتجفف وتُلاحظ تحت المجهر.
في نهاية صبغة الجرام ، ستلاحظ البكتيريا سالبة الجرام باللون الوردي بينما ستلاحظ البكتيريا الموجبة للجرام باللون الأرجواني.
الشكل 01: البكتيريا سالبة الجرام وموجبة الجرام
يتم تحديد نتيجة صبغة الجرام من خلال سماكة طبقة الببتيدوغليكان في جدار الخلية. أثناء خطوة إزالة اللون ، تتم إزالة البقعة الأولية والرائحة بسهولة من البكتيريا سالبة الجرام وتصبح عديمة اللون نظرًا لوجود طبقة رقيقة من الببتيدوغليكان. يتم الاحتفاظ بالبقعة الأولية في البكتيريا موجبة الجرام لأنها تحتوي على طبقة سميكة من الببتيدوغليكان. لن تكون البقعة المضادة فعالة للبكتيريا موجبة الجرام بسبب الاحتفاظ بالبقعة الأولية. وبالتالي ، فإن البكتيريا الموجبة للجرام ستكون مرئية في لون البقعة الأولية ، أي اللون الأرجواني.سوف تلطخ البقعة المضادة للبكتيريا سالبة الجرام ، وستكون مرئية في اختيار اللون ، وهو لون الزعفران. وبالتالي ، من السهل تصنيف البكتيريا إلى مجموعتين من خلال صبغة الجرام وهي ذات قيمة في التمايز والتعرف البكتيري.
ما هو حمض سريع؟
ثبات الحمض هو خاصية فيزيائية لبكتيريا معينة ، خاصة مقاومتها لإزالة اللون بواسطة الأحماض أثناء إجراءات التلوين. بمجرد تلطيخها ، تقاوم هذه الكائنات إجراءات إزالة اللون التي تعتمد على الأحماض أو الإيثانول الشائعة في العديد من بروتوكولات التلوين. وهكذا ، يطلق على تلك الكائنات اسم "الصيام الحمضي". تظهر هذه الخاصية بسبب وجود مستوى عالٍ من المواد الشمعية (الأحماض الفطرية) في جدران الخلايا. هذا الاختبار مهم لتحديد المتفطرة السلية.
الشكل 2: البكتيريا الفطرية الحمضية السريعة
تم تطوير هذه البقعة الحمضية السريعة بواسطة Paul Ehrlich في عام 1882. تم تعديل تقنية Ehrlich السريعة للحمض بواسطة Ziehl-Neelsen ويتم استخدامها الآن بشكل متكرر. يتضمن إجراء تلطيخ الحمض السريع ثلاثة كواشف مختلفة. يستخدم Carbol fuschin باعتباره البقعة الأساسية. يستخدم الكحول الحمضي كعامل إزالة اللون. يستخدم الميثيلين الأزرق كبقع مضاد. يتم تنفيذ إجراء تلطيخ على النحو التالي.
- يتم تطبيق الصبغة الأولية (carbol fuchsin) على العينة الثابتة على الشريحة (سيتم تلوين جميع الخلايا باللون الأحمر).
- يتم تسخين الشريحة بالبخار لمدة 5 دقائق ، مما يدفع البقع إلى داخل الخلايا بشكل صحيح.
- ثم يضاف محلول إزالة اللون (هذا يزيل الصبغة الحمراء من جميع الخلايا باستثناء البكتيريا الحمضية السريعة).
- أزرق الميثيلين يضاف كطبقة مضادة (تلون جميع الخلايا البكتيرية المزيلة اللون).
- البكتيريا الحمضية السريعة تظل حمراء بينما البكتيريا غير الحمضية سريعة البقع باللون الأزرق.
ما هي أوجه التشابه بين صبغة غرام والحموضة السريعة؟
- صبغة الجرام والحمض السريع هما تقنيتان للتلوين التفاضلي.
- كلا الطريقتين تصنف البكتيريا إلى مجموعتين
- كلا الطريقتين تستخدمان بقعتين وأخرى لإزالة اللون.
ما هو الفرق بين صبغة غرام والحموضة السريعة؟
صبغة جرام مقابل حمض سريع |
|
| تلطيخ الجرام هو تقنية تلطيخ تفاضلي ، والتي تقسم البكتيريا إلى مجموعتين من البكتيريا موجبة الجرام والبكتيريا سالبة الجرام. | البقعة الحمضية السريعة هي صبغة تفاضلية تستخدم لتحديد الكائنات سريعة الحموضة من الكائنات غير الحمضية السريعة. |
| صبغة أساسية | |
| اللون البنفسجي الكريستالي هو البقعة الأساسية شائعة الاستخدام في تلطيخ الجرام. | Carbol fuchsin هي البقعة الأساسية المستخدمة في صوم الحمض. |
| وكيل Decolourizing | |
| 95٪ كحول يستخدم كعامل مزيل للون في بقعة غرام. | يستخدم الكحول الحمضي كعامل مزيل للون في الصيام الحمضي. |
| Counter Stain | |
| صبغة جرام تستخدم السافرانين كبقع مضادة. | صبغة حمض سريعة تستخدم الميثيلين الأزرق كبقع مضادة. |
| الملاحظة | |
| لوحظت البكتيريا سالبة الجرام في اختيار اللون ولوحظت البكتيريا الموجبة للجرام باللون الأرجواني. | البكتيريا الحمضية السريعة لوحظت باللون الأحمر ولوحظت البكتيريا غير الحمضية السريعة باللون الأزرق. |
ملخص - صبغة جرام مقابل حمض سريع
من الصعب تصور الكائنات الحية الدقيقة في حالة المعيشة. لذلك ، يتم استخدام البقع البيولوجية وإجراءات التلوين على نطاق واسع لدراسة خصائصها. التلوين التفاضلي هو أحد أنواع تقنيات التلوين المستخدمة للتمييز بين البكتيريا. وصمة الغرام وصمة عار الحمضية هما طريقتان من تقنيات التلوين التفاضلي. يميز تلوين الجرام البكتيريا سالبة الجرام والبكتيريا الموجبة للجرام بناءً على سمك جدران الخلايا. يميز التلوين الحمضي السريع البكتيريا الحمضية عن البكتيريا السريعة غير الحمضية بناءً على محتوى حمض الميكوليك في جدار الخلية. هذا هو الفرق بين صبغة الجرام وصيام الحامض.
تنزيل نسخة PDF من غرام وصمة عار مقابل حمض سريع
يمكنك تنزيل نسخة PDF من هذه المقالة واستخدامها للأغراض غير المتصلة بالإنترنت وفقًا لملاحظة الاقتباس. يرجى تحميل نسخة بدف هنا الفرق بين صبغة غرام وسريع حمض.
