الفرق الرئيسي بين T4 DNA ligase و E. coli DNA ligase هو أن T4 DNA ligase هو إنزيم معزول من البكتيريا T4 بينما E. coli DNA ligase هو إنزيم معزول من بكتيريا E. coli
DNA ligase هو نوع معين من الإنزيم الذي يسهل الانضمام إلى خيوط الحمض النووي معًا من خلال تكوين رابطة فسفودايستر. إنه يلعب دورًا مهمًا من خلال إصلاح الفواصل أحادية الخيط والكسر المزدوج في الحمض النووي للكائنات الحية. علاوة على ذلك ، يستخدم DNA ligase في كل من إصلاح الحمض النووي وتكرار الحمض النووي. بصرف النظر عن الاستخدامات المذكورة أعلاه ، فإن DNA ligase له أيضًا استخدام واسع في تجارب البيولوجيا الجزيئية مثل تقنية الحمض النووي المؤتلف. T4 DNA ligase و E. coli DNA ligase نوعان من إنزيمات DNA ligase.
ما هو T4 DNA Ligase؟
T4 ligase هو إنزيم ينضم إلى الحمض النووي المعزول عن البكتيريا T4. T4 هو فيروس يصيب الإشريكية القولونية. إنزيم T4 ligase هو أكثر ليجاز الحمض النووي استخدامًا في الأبحاث المختبرية البيولوجية الجزيئية. عادة ، يحفز T4 ligase الانضمام إلى خيطين متماسكين أو غير حاد الأطراف من الحمض النووي مزدوج الخيوط بين 5 مجموعات فوسفات و 3 مجموعات هيدروكسيل من النيوكليوتيدات المجاورة. يمكن أن تحفز أيضًا انضمام RNA إلى DNA أو RNA في جزيء مزدوج. ومع ذلك ، فإن هذا الإنزيم لن ينضم إلى الأحماض النووية أحادية السلسلة. علاوة على ذلك ، يمكنه أيضًا ربط الحمض النووي غير الحاد بكفاءة أكبر بكثير من إي كولاي DNA ligase.
الشكل 01: T4 DNA Ligase
يتطلب هذا الإنزيم ATP كعامل مساعد. أنتجت بعض التجارب البحثية في الهندسة الوراثية بالفعل إنزيمات ليجاز الحمض النووي أكثر نشاطًا من ليجاز الحمض النووي من النوع البري T4. في إحدى الطرق ، قاموا بإنشاء جزيء إنزيم اندماج عن طريق تمشيط ليجاز الحمض النووي T4 إلى جزيء p50 أو NF-kB. كان إنزيم T4 ligase الجديد أكثر نشاطًا بنسبة 160 ٪ في عمليات الربط غير الحادة لأغراض الاستنساخ من ligase DNA من النوع البري T4. علاوة على ذلك ، فإن درجة الحرارة المثلى لـ T4 DNA ligase لتحفيز تفاعل الارتباط بشكل أكثر دقة هي 16 درجة مئوية
ما هو E Coli DNA Ligase؟
ه. coli DNA ligase هو إنزيم معزول من بكتيريا E. coli. الجين المسؤول عن صنع إي كولاي DNA ligase هو جين lig. يستخدم الحمض النووي للإشريكية القولونية ، والليغاز ، وكذلك معظم ligases DNA بدائيات النوى ، الطاقة التي يكتسبها NAD (نيكوتيناميد الأدينين ثنائي النوكليوتيد) لإنشاء رابطة الفوسفوديستر.
الشكل 02: E. Coli DNA Ligase
ه. coli DNA ligase هو إنزيم ربط يمكن أن ينضم إلى شظايا الحمض النووي عن طريق تحفيز تكوين روابط فوسفوديستر بين شظايا الحمض النووي المزدوجة التي تحتوي على 5 فوسفات و 3 نهايات هيدروكسيل. علاوة على ذلك ، فإنه لا يقوم بربط الحمض النووي غير الحاد إلا في ظل ظروف خاصة مثل الازدحام الجزيئي بالبولي إيثيلين جلايكول. كما أنه لا يمكنه ضم الحمض النووي الريبي إلى الحمض النووي بكفاءة. علاوة على ذلك ، يمكن تعزيز نشاط E. coli DNA ligase من خلال وجود DNA polymerase 1 بالتركيز الصحيح. ومع ذلك ، عندما يكون تركيز إنزيم DNA polymerase 1 أعلى ، يكون له آثار سلبية على نشاط E. coli DNA ligase.
ما هي أوجه التشابه بين T4 DNA Ligase و E Coli DNA Ligase؟
- T4 DNA ligase و E-coli DNA ligase نوعان من إنزيمات DNA ligase.
- كلاهما بروتينات مكونة من الأحماض الأمينية.
- تحفز هذه الإنزيمات تكوين رابطة فوسفو دايستر بين 5 فوسفات و 3 بوصات هيدروكسيل في DNA مزدوج.
- لديهم استخدامات واسعة في تجارب البيولوجيا الجزيئية مثل تقنية الحمض النووي المؤتلف.
ما هو الفرق بين T4 DNA Ligase و E Coli DNA Ligase؟
T4 DNA ligase هو إنزيم يتم عزله من البكتيريا T4 بينما E. coli DNA ligase هو إنزيم معزول من بكتيريا E. coli. وبالتالي ، هذا هو الفرق الرئيسي بين T4 DNA ligase و E. coli DNA ligase. علاوة على ذلك ، فإن مصدر الطاقة لـ T4 DNA ligase هو ATP. من ناحية أخرى ، مصدر الطاقة لـ E. coli DNA ligase هو NAD.
يعرض الرسم البياني أدناه الاختلافات بين T4 DNA ligase و E coli DNA ligase في شكل جدول للمقارنة جنبًا إلى جنب.
ملخص - T4 DNA Ligase مقابل E Coli DNA Ligase
T4 DNA ligase و E. coli DNA ligase هما إنزيمان يحفزان تكوين رابطة phosphodiester بين 5 'فوسفات و 3' hydroxyl termini في DNA مزدوج. T4 ligase هو إنزيم يتم عزله من البكتيريا T4 بينما E. coli DNA ligase هو إنزيم معزول من بكتيريا E. coli. إذن ، هذا هو الفرق الرئيسي بين T4 DNA ligase و E coli DNA ligase.
