الفرق الرئيسي - النيتروسليلوز مقابل غشاء النايلون
النشاف هو تقنية مهمة للكشف عن تسلسلات معينة من الحمض النووي ، والحمض النووي الريبي ، والبروتينات من خلائطها في البيولوجيا الجزيئية. يتم ذلك باستخدام غشاء يسمى لطخة. هناك تقنيات النشاف المختلفة مثل النشاف الشمالي والجنوبي والغربي. يجب أن يتم اختيار الغشاء المناسب لعملية النشاف بعناية لمنع الارتباط غير المحدد والاكتشافات الخاطئة. تُستخدم أغشية النيتروسليلوز والنايلون و PVDF بشكل شائع في تقنيات النشاف. لديهم خصائص مختلفة. يتمثل الاختلاف الرئيسي بين غشاء النيتروسليلوز والنايلون في أن أغشية النيتروسليلوز لها قدرة عالية على تجميد البروتين بينما تتمتع أغشية النايلون بإمكانية عالية لتثبيط الحمض النووي.ومع ذلك ، كثيرا ما يستخدم كلا النوعين من الأغشية في تقنيات النشاف.
ما هو غشاء النيتروسليلوز؟
غشاء النيتروسليلوز هو مرشح غشاء شائع الاستخدام في تقنيات الحمض النووي والبروتين النشاف. لديه قدرة عالية على الارتباط بالبروتين. ومن ثم ، فإن أغشية النيتروسليلوز تستخدم على نطاق واسع في تقنية النشاف الغربي. تتوافق أغشية النيتروسليلوز مع جميع تقنيات التهجين وتُظهر قدرات ربط فائقة دون تداخلات. تتميز أغشية النيتروسليلوز بأنها محبة للماء بطبيعتها. إنهم يصنعون تفاعلًا محببًا للماء مع الجزيئات ويثبّتها بكفاءة على الغشاء. تتوفر أغشية النيتروسليلوز التجارية بحجمين من المسام: 0.45 و 0.2 ميكرومتر.
الشكل 01: غشاء النيتروسليلوز المستخدم في النشاف الغربي
ما هو غشاء النايلون؟
غشاء النايلون هو نوع آخر من الأغشية التجارية المستخدمة في تقنيات النشاف. يتم استخدامه بدلاً من ذلك مع أغشية النيتروسليلوز للنشاف الجنوبي والشمالي. تعتبر أغشية النايلون مثالية للنشاف الجنوبي أكثر من النيتروسليلوز نظرًا لارتباطها الشديد بالحمض النووي. نظرًا للعديد من الميزات الفريدة لأغشية النايلون ، يستخدم الباحثون عادةً أغشية النايلون للنشاف الجنوبي والشمالي بدلاً من غشاء النيتروسليلوز. يُنصح أيضًا باستخدام أغشية النايلون للتجريد والكسر ، على عكس النيتروسليلوز.
الشكل 02: غشاء نايلون يستخدم في النشاف الجنوبي
ما الفرق بين غشاء النيتروسليلوز والنايلون؟
النيتروسليلوز مقابل غشاء النايلون |
|
| أغشية النيتروسليلوز هشة. | أغشية النايلون أقل هشاشة. |
| المناولة | |
| يصعب التعامل معها | يسهل التعامل معها |
| Reprobing | |
| يصعب استنساخ أغشية النيتروسليلوز غير المدعومة. | ريبروبينج سهل مع أغشية النايلون. |
| التوافق مع ظروف التخزين المختلفة | |
| أغشية النيتروسليلوز لديها قوة أقل لتحمل ظروف التخزين المختلفة. | تستجيب أغشية النايلون بقوة أكبر لظروف التخزين المختلفة. |
| استخدم | |
| الإعداد المسبق مطلوب. | التبويض المسبق غير مطلوب لأغشية النايلون. |
| طبيعة ماء | |
| أغشية النيتروسليلوز محبة للماء بطبيعتها ولكنها أقل ماءً من أغشية النايلون. | هي عالية الماء بطبيعتها. |
| إمكانية التثبيت | |
| أغشية النيتروسليلوز لها تقارب أقل للأحماض النووية. لكن لديه انجذاب كبير للبروتينات. | أغشية النايلون لديها إمكانات ربط عالية مع الأحماض النووية من أغشية النيتروسليلوز. |
ملخص - النيتروسليلوز مقابل غشاء النايلون
أغشية النيتروسليلوز والنايلون عبارة عن صفائح خاصة تُستخدم في تقنية النشاف لإعادة إنتاج نمط النطاقات على الجل.إنها تتيح إمكانية اكتشاف تسلسل معين أو بروتين من المخاليط عن طريق تجميدها على الغشاء. بمجرد تجميد الجزيئات على الغشاء ، يمكن استخدامها كركيزة لتحليل التهجين باستخدام المسابير المسمى. يشيع استخدام غشاء النيتروسليلوز للكشف عن البروتين في تقنية النشاف الغربية نظرًا لارتباطه الشديد بالبروتينات. غالبًا ما تستخدم أغشية النايلون في النشاف الجنوبي والشمالي. هذا هو الفرق بين النيتروسليلوز وغشاء النايلون.
