الاختلاف الرئيسي بين إنزيمات التقييد EcoRI و HindIII هو أن EcoRI هو إنزيم مقيد من النوع الثاني معزول عن E. coli ، بينما HindIII هو إنزيم تقييد من النوع II معزول عن المستدمية النزفية.
إنزيم التقييد أو نوكلياز التقييد هو إنزيم يشق الحمض النووي إلى أجزاء في مواقع التعرف المحددة (مواقع التقييد) داخل جزيء الحمض النووي. تم العثور على إنزيمات التقييد هذه في البكتيريا والعتائق. أنها توفر آلية دفاع ضد غزو الفيروسات. تُصنف إنزيمات التقييد عمومًا إلى خمسة أنواع مختلفة: النوع الأول والنوع الثاني والنوع الثالث والرابع والنوع الخامس. EcoRI و HindIII هما إنزيمات تقييدية تنتمي إلى مجموعة إنزيمات التقييد من النوع الثاني.
ما هي إنزيمات التقييد EcoRI؟
EcoRI هو إنزيم تقييد من النوع الثاني معزول عن أنواع الإشريكية القولونية. إنه إنزيم التقييد الذي يشق حلزونات الحمض النووي المزدوجة إلى أجزاء في مواقع محددة. EcoRI هو أيضًا جزء من نظام تعديل التقييد. كان EcoRI هو أول إنزيم تم عزله في الأصل من سلالة RY13 من نوع E. coli. يتم استخدامه كإنزيم تقييد في البيولوجيا الجزيئية. تقوم شركة EcoRI بإنشاء 4 نهايات لزجة من النيوكليوتيدات مع 5 نهايات متدلية من AATT. يقوم EcoRI بقطع الحمض النووي عند تسلسل التعرف المحدد G ↓ AATTC. لديها التسلسل التكميلي المتناوب لـ CTTAA-G. علاوة على ذلك ، ينتمي إنزيم التقييد هذا إلى الفئة الفرعية من النوع II P (الخصوصية المتناظرة). يحتوي EcoRI في هيكله الأساسي على شكل PD. D / EXK داخل موقعه النشط ، مثل العديد من إنزيمات التقييد الأخرى.
الشكل 01: EcoRI
إنزيم التقييد EcoRI هو جهاز homodimer يبلغ 31 كيلو دالتون. يحتوي على مجال كروي واحد لمعمارية α / β. تحتوي كل وحدة فرعية على حلقة تخرج من المجال الكروي وتلتف حول الحمض النووي عندما تكون مرتبطة. يمكن بلورة هذا الإنزيم بالتسلسل الذي يقطعه عادةً. علاوة على ذلك ، يتم استخدام إنزيم التقييد EcoRI في مجموعة متنوعة من التقنيات الوراثية الجزيئية ، بما في ذلك الاستنساخ وفحص الحمض النووي وأقسام الحذف لظروف الحمض النووي في المختبر.
ما هي إنزيمات تقييد HindIII؟
HindIII هو إنزيم مقيد من النوع الثاني معزول عن أنواع أنفلونزا المستدمية. يشق تسلسل الحمض النووي المتناوب AACCTT في وجود العامل المساعد Mg2+من خلال التحلل المائي.ينتج عن انشقاق هذا التسلسل المعين بين AA’S (5’A ACCTT3’و 3’TTCGA-A5’) 5 بروزات متدلية على جزيء DNA يسمى النهايات اللاصقة. يوجد هذا الإنزيم في الكائنات بدائية النواة مثل البكتيريا. تستخدم البكتيريا هذا الإنزيم كآلية دفاع ضد الفيروسات مثل العاثيات.
الشكل 02: HindIII
هيكليا ، HindIII هو homodimer. يحتوي على نواة هيكلية مشتركة تتكون من أربعة صفائح ولولب α واحد ، مثل الأنواع الأخرى من إنزيمات التقييد II. الكتلة الجزيئية لهذا الإنزيم هي 34.9 كيلو دالتون. علاوة على ذلك ، يعد HindIII مفيدًا جدًا في تجارب العلوم البيولوجية الجزيئية الحديثة مثل تسلسل الحمض النووي ورسم الخرائط.
ما هي أوجه التشابه بين إنزيمات التقييد EcoRI و HindIII؟
- EcoRI و HindIII هما إنزيمات تقييدية تنتمي إلى مجموعة إنزيم التقييد من النوع الثاني.
- تم العثور على EcoRI و HindIII في أوائل السبعينيات.
- يحتوي كل من EcoRI و HindIII على شكل تسلسل الأحماض الأمينية PD.. D / EXK.
- كلا الإنزيمات التقييدية تؤدي إلى تشقق محدد للغاية للحمض النووي.
- تحتاج إنزيمات التقييد هذه إلى Mg2 + كعامل مساعد لنشاطها المحدد.
- ينتجون نهايات لزجة بعد قطع الحمض النووي.
- إنها مكونات مفيدة جدًا في الأبحاث البيولوجية الجزيئية الحديثة.
ما هو الفرق بين إنزيمات التقييد EcoRI و HindIII؟
EcoRI هو إنزيم مقيد من النوع الثاني معزول عن أنواع E.coli ، بينما HindIII هو إنزيم مقيد من النوع II معزول عن أنواع المستدمية النزلية. وبالتالي ، هذا هو الفرق الرئيسي بين EcoRI و HindIII.علاوة على ذلك ، تقطع EcoRI الحمض النووي في تسلسل التعرف المحدد G ↓ AATTC ، بينما يقطع HindIII الحمض النووي في تسلسل التعرف المحدد A ↓ ACCTT.
يعرض الرسم البياني أدناه الاختلافات بين EcoRI و HindIII في شكل جدول للمقارنة جنبًا إلى جنب.
ملخص - إنزيمات التقييد EcoRI مقابل HindIII
EcoRI و HindIII هما إنزيمان مقيدان ينتميان إلى الفئة الفرعية من النوع II p. يقومون بإجراء شق محدد للغاية للحمض النووي. EcoRI هو إنزيم مقيد من النوع الثاني يتم عزله عن أنواع E.coli ، في حين أن HindIII هو إنزيم مقيد من النوع II معزول عن أنواع أنفلونزا المستدمية. لذلك ، هذا يلخص الفرق بين EcoRI و HindIII.
