التحول مقابل التجنس
التحول و تعداء هما طريقتان بسيطتان تستخدمان لإدخال جين غريب في خلية مضيفة. ومع ذلك ، تعتمد هذه التقنيات على نوع المضيف أو أنظمة ناقلات.
ما هو تحويل الخلايا؟
التحول هي التقنية المستخدمة لإدخال الجينات في الخميرة والخلايا البكتيرية. عادة ما تسبب هذه التقنية تغييرات وراثية في الجينات ، وبالتالي يكون التعبير عن الجين دائمًا. تم تقديم التحول البكتيري لأول مرة في عام 1928 من قبل فريدريك جريفيث. ثم في أوائل السبعينيات ، تم استخدام هذه التقنية في بكتيريا E.القولونية. أثناء عملية تحول الإشريكية القولونية ، تنقع الخلايا في محلول مثلج بارد من CaCl2هذه الخطوة تجعل خلايا الإشريكية القولونية مختصة. بعد ذلك ، يتم خلط الخلايا المختصة مع DNA البلازميد ويتم تحضينها على الجليد لمدة 20-30 دقيقة. ثم يتم إعطاء صدمة حرارية قصيرة للسماح بنقل الحمض النووي إلى الخلية. أخيرًا ، توضع الخلايا في مرق مغذي وتحضن عند 37 درجة مئوية لمدة 60-90 دقيقة من أجل إنشاء البلازميدات. بمجرد اكتمال هذه الخطوات بنجاح ، يمكن وضع الخلايا المحولة على وسائط مناسبة لنشر الخلايا. نظرًا لأن التحويل يعتبر أسلوبًا غير فعال ، فلا يجوز استخدامه لإعداد البنوك المستنسخة.
ما هو ترنسفكأيشن الخلايا؟
ترنسفكأيشن هي طريقة لإدخال جين غريب ، عادة ، في خلايا الثدييات. هناك طريقتان للترنسفكأيشن. وهي ، تعداء عابرة وترنسفكأيشن مستقرة. في تعداء عابرة ، يكون التعبير الجيني متاحًا لفترة محدودة ؛ وبالتالي ، فإن تغيير الجين يسبب تعبيرًا مؤقتًا.هذه الطريقة تعد بسيطة وسريعة. ومن ثم يمكن استخدامه بشكل روتيني. عيب واحد من تعداء عابرة هو صعوبة التقديم لأنظمة تخليق البروتين على نطاق واسع.
أثناء تعداء مستقر ، يتم دمج الجين المستهدف في جينوم الخلية المضيفة ، وبالتالي يكون التعبير الجيني دائمًا ، على عكس تعداء عابرة.
ما هو الفرق بين التحول وترنسفكأيشن؟
• التحول هو إدخال الجين إلى خلية بدائية النواة (بكتيرية وخميرة) ، بينما يُطلق على تعداء العدوى عادةً إدخال جين إلى خلية ثديية.
• يؤدي التحول إلى تغيير وراثي في الجينات ، في حين أن تعداء العدوى يمكن أن تؤدي إما إلى تعبير مؤقت أو تغييرات دائمة في الجينات.
