الفرق الرئيسي - جل الكهربائي مقابل صفحة SDS
الكهربائي هو تقنية تفصل الجزيئات الكبيرة في مجال كهربائي. إنها طريقة شائعة في علم الأحياء الجزيئي لفصل الحمض النووي ، والحمض النووي الريبي والبروتينات من الخلائط وفقًا لأحجامها الجزيئية. SDS Page هو نوع من الرحلان الكهربائي للهلام يستخدم لفصل البروتينات عن خليط البروتين بناءً على أحجامها. الرحلان الكهربائي للهلام هو مصطلح يستخدم للإشارة إلى التقنية العادية المطبقة على DNA و RNA وفصل البروتين بينما SDS Page هي نوع واحد من الرحلان الكهربائي للهلام. هذا هو الفرق الرئيسي بين الرحلان الكهربائي للهلام وصفحة SDS.
ما هو هلام الكهربائي؟
الكهربائي هو تقنية شائعة تستخدم في المختبرات لفصل الجزيئات المشحونة مثل الحمض النووي ، والحمض النووي الريبي ، والبروتينات ، وما إلى ذلك من مخاليطها. يستخدم الجل في الرحلان الكهربائي للهلام. يعمل كمنخل جزيئي. هناك نوعان من المواد الهلامية المستخدمة في الرحلان الكهربائي للهلام وهما agarose و polyacrylamide. يعد اختيار مستحضر الهلام والهلام من العوامل المهمة التي يجب مراعاتها في الحبيبات الكهربائية للهلام حيث يجب معالجة حجم مسام الهلام بعناية من أجل الفصل الجيد للجزيئات من خلال الرحلان الكهربائي للهلام. يحتوي الرحلان الكهربائي للهلام على مجال كهربائي متصل بطرفين من الهلام. يظهر أحد طرفي الجل شحنة موجبة بينما الطرف الآخر سالب الشحنة
DNA و RNA جزيئات سالبة الشحنة. بمجرد تحميلها في الهلام من الطرف السلبي للجيل وتطبيقها على المجال الكهربائي ، فإنها تهاجر عبر مسام الهلام باتجاه النهاية الموجبة الشحنة للجيل.تعتمد سرعة الهجرة على الشحنة وحجم الجزيء. تنتقل الجزيئات الأصغر بسهولة عبر مسام الهلام مقارنة بالجزيئات الأكبر. ومن ثم ، تنتقل الجزيئات الأصغر لمسافة طويلة عبر الهلام وتنتقل الجزيئات الأكبر مسافة قصيرة. لمراقبة انتقال الجزيئات على الجل ، يتم استخدام أنواع خاصة من الأصباغ. يتم تطبيق المجال الكهربائي لفترة زمنية معينة ويتوقف لمنع فقدان الجزيئات وللحفاظ على الجزيئات في مواضع انتقالها. يمكن ملاحظة العصابات المختلفة في الجل. تمثل هذه العصابات الجزيئات ذات الأحجام المختلفة. ومن ثم ، فإن الفصل الكهربائي للهلام مفيد في تمييز الجزيئات وفقًا لأحجامها.
تم دمج الرحلان الكهربائيفي تقنيات مختلفة كتقنية تحضيرية في البيولوجيا الجزيئية مثل PCR ، RFLP ، الاستنساخ ، تسلسل الحمض النووي ، النشاف الجنوبي ، رسم خرائط الجينوم ، إلخ.
الشكل 01: الاغاروز الكهربائي للهلام
ما هي صفحة SDS؟
الرحلان الكهربائي للهلام دوديسيل كبريتات بولي أكريلاميد الصوديوم (صفحة SDS) هو نوع من الرحلان الكهربائي للهلام يستخدم لفصل البروتينات. عند استخدام الرحلان الكهربائي للهلام لفصل البروتينات ، هناك حاجة إلى علاجات خاصة لأن البروتينات ليست سالبة الشحنة مثل الحمض النووي والحمض النووي الريبي ولا تنتقل نحو النهاية الإيجابية أو النهاية السلبية. ومن ثم ، يتم تغيير طبيعة البروتينات وتغليفها بشحنة سالبة قبل الفصل الكهربائي للهلام. يتم ذلك باستخدام منظف يسمى كبريتات دوديسيل الصوديوم (SDS). يُعرف الرحلان الكهربائي للهلام الذي يستخدم SDS وهلام بولي أكريلاميد للوسيط الداعم باسم صفحة SDS. تستخدم هذه التقنية بشكل شائع في الكيمياء الحيوية وعلم الوراثة والطب الشرعي والبيولوجيا الجزيئية.
خلال صفحة SDS ، يتم خلط البروتينات مع SDS. تفتح SDS البروتينات في شكل خطي وتغطيها بشحنة سالبة تتناسب مع كتلتها الجزيئية.بسبب الشحنة السالبة ، تهاجر جزيئات البروتين نحو نهاية الشحنة الموجبة للهلام وتفصل وفقًا لكتلها الجزيئية. في صفحة SDS ، يتم استخدام بولي أكريلاميد كدعم صلب للهلام. يعتمد الفصل الفعلي للبروتينات بشكل أساسي على خصائص الهلام. ومن ثم ، يجب تحضير جل بولي أكريلاميد بعناية واستخدام التركيزات الصحيحة من بولي أكريلاميد. تظهر المواد الهلامية بولي أكريلاميد دقة عالية من المواد الهلامية الاغاروز. وبالتالي ، تعتبر صفحة SDS تقنية عالية الدقة لفصل البروتين.
صفحة SDS هي نوع من تغيير طبيعة هلام التفريد. لديها قيود كبيرة في تحليل البروتين. نظرًا لأن SDS يفسد البروتينات قبل الفصل ، فإنه لا يسمح باكتشاف النشاط الأنزيمي ، وتفاعلات ربط البروتين ، والعوامل المساعدة للبروتين ، وما إلى ذلك.
الشكل 02: صفحة SDS
ما هو الفرق بين الرحلان الكهربائي للهلام وصفحة SDS؟
الهلام الكهربائي مقابل صفحة SDS |
|
| الكهربائي هو طريقة يتم إجراؤها لفصل الجزيئات الكبيرة باستخدام مجال كهربائي. | صفحة SDS هي تقنية رحلان جل عالي الدقة تستخدم لفصل البروتينات بناءً على كتلتها. |
| جل ران | |
| يمكن إجراؤها بطريقة أفقية أو رأسية. | صفحة SDS تعمل دائمًا عموديًا. |
| أساس الفصل | |
| يحدث الفصل حسب الشحن والحجم. | يحدث فصل البروتين حسب الكتلة والشحنة |
| القرار | |
| يحتوي الرحلان الكهربي لهلام الاغاروز على دقة منخفضة والرحلان الكهربي للهلام بولي أكريلاميد دقة أعلى | صفحة SDS لديها دقة أفضل. |
| التمسخ | |
| يشتمل الرحلان الكهربائي للهلام على كل من تقنيات تغيير الطبيعة وعدم تغيير الطبيعة. | صفحة SDS تفسد البروتينات قبل الانفصال. |
ملخص - هلام الكهربائي مقابل صفحة SDS
الكهربائي هو تقنية شائعة تستخدم لفصل وتحليل الحمض النووي ، والحمض النووي الريبي والبروتينات على أساس حجمها وشحنها. هناك نوعان رئيسيان من الرحلان الكهربائي للهلام وهما الاغاروز الكهربائي للهلام والهلام الكهربي بولي أكريلاميد. تستخدم المواد الهلامية Agarose بشكل رئيسي لفصل الحمض النووي ؛ عند الحاجة إلى دقة أعلى ، يتم استخدام مواد هلامية بولي أكريلاميد. SDS Page هو نوع من الرحلان الكهربائي للهلام يستخدم بشكل شائع لفصل الخلائط المعقدة من البروتينات. تعتبر تقنية فصل البروتين عالية الدقة. هذا هو الفرق بين الرحلان الكهربائي للهلام وصفحة SDS.
