الفرق الرئيسي بين التلوين التدريجي والتراجع هو أنه في التلوين التدريجي ، يتم ترك الأنسجة في محلول التلوين لفترة كافية للوصول إلى نقطة النهاية المرغوبة بينما في التلطيخ التراجعي ، يتم ترك الأنسجة عمداً لتلطيخ أكثر من اللازم حتى تشبع الصبغة جميع عناصر الأنسجة ثم تزيل البقع.
التلوين هي تقنية تبرز وتميز مكونات الأنسجة وتجعل من الممكن ملاحظتها تحت المجهر. تلطيخ H و E هو الإجراء العام لتلطيخ الأنسجة الأكثر استخدامًا في علم الأنسجة. يستخدم الهيماتوكسيلين ويوزين (صبغة مضادة).يمكن تحقيق التلوين النووي باستخدام الهيماتوكسيلين باستخدام تقنيات التلوين التدريجي أو التراجعي. تستخدم بعض تركيبات الهيماتوكسيلين في التلوين التدريجي. ومن الأمثلة على ذلك الهيماتوكسيلين من إنتاج ماير. تحتوي البقع التدريجية على تركيز منخفض من الهيماتوكسيلين. ومن ثم ، فإنها تلطخ الكروماتين ببطء وبشكل انتقائي. تستخدم بعض التركيبات الأخرى في تلطيخ الانحدار. يستخدم Harris haematoxylin في تلطيخ الانحدار. تحتوي البقع الارتدادية على نسبة عالية من الهيماتوكسيلين. وبالتالي ، تنتشر البقعة بسرعة على الخلية بأكملها.
ما هو التلوين التدريجي؟
التلوين التدريجي هو تقنية تسمح للأنسجة الموجودة في محلول التلوين لفترة كافية للوصول إلى نقطة النهاية المرغوبة. لذلك ، هناك حاجة إلى المراقبة المتكررة لجودة البقع لتحديد اكتمال التلوين. يتم التحكم في كثافة التلوين بواسطة وقت الغمر.
الشكل 01: هيكل الهيماتوكسيلين
الهيماتوكسيلين جيل وهيماتوكسيلين ماير تقدمية بطبيعتها. بالنسبة لهذين النوعين من الدم ، يتم استخدام وقت تلطيخ من 5-10 دقائق بشكل شائع في التلوين التدريجي. بشكل عام ، تكون الهيماتوكسيلينات التدريجية أقل تركيزًا. ومن ثم ، فإنها تلطخ الكروماتين ببطء وبشكل انتقائي. في التلوين التدريجي ، يقوم الهيماتوكسيلين بشكل أساسي بتلطيخ الكروماتين بالشدة المرغوبة. وبالتالي ، فإنه لا يتطلب التمايز في الكحول الحمضي المخفف لسحب البقعة الزائدة.
ما هو التلوين الانحداري؟
التلوين الانحداري هو أسلوب تلطيخ أسرع يتم فيه تلطيخ الأنسجة عمدا حتى تشبع الصبغة جميع مكونات الأنسجة. ثم يتم إزالة البقع بشكل انتقائي من الأنسجة حتى تصل إلى نقطة النهاية الصحيحة. تسمى خطوة إزالة التلوين بالتمايز. يتم التفريق لإزالة البقع الزائدة.عادة ، يتم ذلك باستخدام الكحول الحمضي المخفف.
الشكل 02: H و E تلطيخ
Harris haematoxylin هو النوع الشائع الاستخدام من الهيماتوكسيلين. تستخدم الهيماتوكسيلينات من إيرليش وديلافيلد أيضًا في تلطيخ التراجع. تحتوي البقع الارتدادية على نسبة عالية من الهيماتوكسيلين. ومن ثم ، فإنها تنشر الخلية بأكملها بسرعة وتؤدي إلى تلطيخ الكروماتين والسيتوبلازم. يُفضل التلوين الانحداري عند الحاجة إلى تمييز واضح جدًا لعناصر الأنسجة.
ما هي أوجه التشابه بين التلوين التدريجي والتراجع؟
- التلوين التدريجي والتراجع نوعان من تقنيات التلوين.
- كلاهما يستخدم الصبغة المسماة الهيماتوكسيلين.
ما هو الفرق بين التلوين التدريجي والتراجع؟
التلوين التدريجي هو عملية تلطيخ أبطأ يتم فيها ترك الأنسجة في محلول التلوين لفترة كافية للوصول إلى نقطة النهاية المرغوبة. على النقيض من ذلك ، فإن التلوين الارتدادي هو عملية تلطيخ أسرع يتم فيها تلطيخ الأنسجة بشكل متعمد ثم إزالة البقع. لذلك ، هذا هو الفرق الرئيسي بين التلوين التدريجي والتراجع.
علاوة على ذلك ، هناك اختلاف مهم آخر بين التلوين التدريجي والتراجع وهو أن التلوين التدريجي لا يتطلب خطوة إضافية تسمى التمايز ، بينما يتطلب التلوين التراجعي التمايز من أجل إزالة البقع الزائدة. إلى جانب ذلك ، تحتوي البقع التدريجية على تركيز منخفض من الهيماتوكسيلينات ، بينما تحتوي البقع التراجعية على تركيز أعلى من الهيماتوكسيلينات.
الجدول البياني أدناه يوضح المزيد من الاختلافات بين التلوين التدريجي والتراجع.
ملخص - تلطيخ تقدمي مقابل تلطيخ تراجعي
التلوين التدريجي هو أسلوب تلطيخ بطيء يتم فيه ترك الأنسجة في محلول التلوين لفترة كافية للوصول إلى نقطة النهاية. لذلك ، لا يتم إجراء تلطيخ أكثر من اللازم ، فهو تلطيخ تدريجي. على النقيض من ذلك ، فإن التلوين الارتدادي هو تقنية تلطيخ أسرع يتم فيها تلطيخ الأنسجة بشكل زائد ثم إزالة البقع. لا يتطلب التلوين التدريجي التمايز (إزالة البقع الزائدة) بينما يتطلب التلوين التراجعي التمايز في الكحول الحمضي المخفف من أجل إزالة البقع الزائدة. تحتوي البقع التدريجية عمومًا على تركيز منخفض من الهيماتوكسيلين بينما تحتوي البقع التراجعية على تركيز أكبر من الهيماتوكسيلينات. وبالتالي ، هذا يلخص الفرق بين التلوين التدريجي والتراجع.
