الفرق الرئيسي بين مقايسة النوى الصغيرة والمذنب هو أن فحص النواة الدقيقة مهم للتحقق من تلف الكروموسومات نتيجة التعرض للطفرات ، في حين أن فحص المذنب مهم للكشف عن تلف الحمض النووي الأساسي في الخلايا الفردية.
تساعد فحوصات السمية الجينية على تقييم احتمالات الطفرات والتشوهات الصبغية. تشمل السموم الجينية المواد الكيميائية والإشعاع. تعد المواد المسرطنة والمطفرة والمواد المسخية الفئات الرئيسية للسموم الجينية. إنها تسبب أضرارًا مختلفة مثل الطفرات النقطية ، والحذف ، والكسر المفردة والمزدوجة ، والانحرافات الصبغية ، وتكوينات النوى الصغيرة ، وإصلاح الحمض النووي ، وتفاعلات دورة الخلية.قد تؤدي مثل هذه الحالات إلى مجموعة متنوعة من الأمراض ، وتمنع فحوصات السمية الجينية الضرر المحتمل من هذه الحالات. مقايسة النواة الدقيقة ومقايسة المذنب هما تقنيتان تحت فحوصات السمية الجينية.
ما هو فحص النواة الدقيقة؟
مقايسة النواة الدقيقة هي اختبار لتقييم الضرر الكروموسومي نتيجة التعرض للطفرات. من المهم في فحص المواد الكيميائية التي تسبب تكوين المغزل ونواة صغيرة. يوفر اختبار النواة الصغيرة معلومات عن ثبات المواد الكيميائية عند التداخل مع بنية ووظيفة الكروموسوم. العديد من المواد المسرطنة تكون إيجابية في فحوصات النواة الدقيقة. تتضمن عملية الفحص معالجة كيميائية وقياس تواتر الخلايا الدقيقة النوى. إذا كانت هناك زيادة غير طبيعية في عدد الخلايا الدقيقة ، فإنها تستنتج أن المادة الكيميائية تسبب تلف الكروموسومات.
عادة ما يتم إجراء فحص النواة الدقيقة على الخلايا المنقسمة بنشاط. لذلك ، فإن خلايا الدم الحمراء والخلايا الجذعية لنخاع العظام التي يتم إنتاجها من خلال الانقسامات الخلوية هي مرشحة مثالية لمثل هذه الاختبارات.إنهم يعانون من دوران ثابت وسريع. نظرًا لأن كريات الدم الحمراء لا تحتوي على نوى حقيقية ، فإنها تجعل الخلايا ذات النواة الدقيقة أكثر وضوحًا في نهاية الفحص.
الشكل 01: مراقبة فحص النواة الدقيقة
فحوصات النواة الدقيقة اقتصادية ، وأسرع ، ومريحة ، وتتطلب مهارات أقل لتنفيذها. إنها تعكس الانحرافات الصبغية بسرعة بطريقة موثوقة وهي مفيدة للغاية لتقييم الأضرار الصبغية بسرعة. هناك نوع خاص ومتعدد الاستخدامات من مقايسة النواة الدقيقة هو فحص الكتلة الخلوية للنواة الدقيقة (CBMNcyt). إنه الاختبار المفضل لقياس الضرر الكروموسومي وعدم الاستقرار في الخلايا. ومع ذلك ، فإن المشكلة الرئيسية لاستخدام مقايسة النواة الصغيرة هي أنه غير قادر على تحديد أنواع مختلفة من الانحرافات الصبغية ، وله تأثير على معدل الانقسام ونسبة موت الخلية ، مما يتسبب في تغيير النتائج.
ما هو فحص المذنب؟
مقايسة المذنب ، والتي تُعرف أيضًا باسم مقايسة الرحلان الكهربائي للهلام الفردي ، هي تقنية بسيطة وحساسة للكشف عن تلف الحمض النووي. إنه يقيس تكسر الحمض النووي في الخلايا حقيقية النواة وهو أسلوب قياسي للمراقبة الحيوية واختبار السمية الجينية.
تشارك مقايسة المذنب في تغليف الخلايا في معلقات agarose ذات نقطة انصهار منخفضة ، وتحلل الخلايا في ظروف محايدة أو قلوية ، ورحلان كهربائي للخلايا المعلقة. أثناء عملية التغليف ، يتم تعليق الخلايا في نقطة انصهار منخفضة منصهرة [اغروس) ، ويشكل الاغاروز مصفوفة من ألياف الكربوهيدرات لتثبيتها في مكانها. الاغاروز محايد تناضحيًا ؛ لذلك ، فهو يمكّن المحاليل من اختراق الجل والتأثير على الخلايا دون إزعاجها وتحريكها. محلول التحلل هو محلول ملح مائي عالي التركيز ومنظف. يعطل هذا الملح البروتينات وأنماط الترابط داخل الخلية بينما يعطل محتوى RNA للخلية.تدمر الخلايا ، وجميع البروتينات ، RNA ، والمكونات السيتوبلازمية والنووية ، تتعطل وتنتشر في مصفوفة الاغاروز ، تاركة الحمض النووي.
الشكل 02: فحص المذنب
محلول الرحلان الكهربائي هو محلول قلوي حيث يتغير شكل اللولب المزدوج للحمض النووي ، ويصبح النوكليويد أحادي الجديلة. خلال هذه العملية ، يتم تطبيق مجال كهربائي لتحليل الصور. يقيس تحليل الصورة الكثافة الإجمالية للفلورة للحمض النووي والنيوكليويد ويقارن الاثنين. يشبه الهيكل العام مذنبًا برأس دائري يتوافق مع الحمض النووي المتبقي غير التالف وذيل الحمض النووي التالف. كلما كان الذيل أكثر إشراقًا وطولًا بسبب الإشارات الأقوى ، ارتفع مستوى الضرر.
ما هي أوجه التشابه بين Micronucleus و Comet Assay؟
- النوى الدقيقة ومقايسة المذنب اقتصادية ، وأسرع ، ومريحة ، وتتطلب مهارات أقل.
- يتم إجراؤها بشكل أساسي على الحمض النووي.
- كلا الفحصين يساعدان في تقييم الطفرات والتشوهات الصبغية.
- علاوة على ذلك ، تستخدم كلتا الطريقتين مواد كيميائية لتنفيذ الإجراء.
ما هو الفرق بين Micronucleus و Comet Assay؟
يعتبر فحص النواة الدقيقة مهمًا في التحقق من تلف الكروموسومات نتيجة التعرض للطفرات ، بينما يعتبر فحص المذنب مهمًا في الكشف عن تلف الحمض النووي الأساسي في الخلايا الفردية. وبالتالي ، هذا هو الفرق الرئيسي بين مقايسة النوى الصغيرة والمذنب. أيضًا ، تم إنشاء اختبار النواة الدقيقة للكشف عن التكاثر والتكاثر. يتم استخدام اختبار المذنب كاختبار السمية الجينية للكشف عن تلف الحمض النووي الأساسي في الخلايا. علاوة على ذلك ، يوفر اختبار النواة الصغيرة معلومات عن ثبات المواد الكيميائية ، في حين أن مقايسة المذنب هي عبارة عن خلية أحادية الهلام الكهربائي.
يعرض الرسم البياني أدناه الاختلافات بين مقايسة النواة الصغيرة والمذنب في شكل جدول للمقارنة جنبًا إلى جنب.
ملخص - Micronucleus vs Comet Assay
تساعد فحوصات السمية الجينية على تقييم احتمالات الطفرات والتشوهات الصبغية. مقايسة النواة الدقيقة ومقايسة المذنب هما تقنيتان تحت فحوصات السمية الجينية. يقيّم فحص النواة الدقيقة الضرر الصبغي نتيجة التعرض للطفرات. فحص المذنب هو تقنية بسيطة وحساسة للكشف عن تلف الحمض النووي. إذن ، هذا هو الفرق الرئيسي بين فحص النوى الصغيرة والمذنب. يعتبر فحص النواة الدقيقة مهمًا في فحص المواد الكيميائية التي تسبب تكوين المغزل والنوى الصغيرة. تشارك مقايسة المذنب في تغليف الخلايا في معلقات agarose ذات نقطة انصهار منخفضة ، وتحلل الخلايا في ظروف محايدة أو قلوية ، ورحلان كهربائي للخلايا المعلقة.
